CAJ | 학술논문

目的了解Wnt/β-catenin信号途径对小鼠单核/巨噬细胞Raw264.7的分化调控.方法将细胞分为4组:阴性对照组(即空Raw264.7组)、实验对照组(即感染Ad-GFP组)、阳性对照组(即50 ng/mL RANKL诱导组)和实验组(即感染Ad-β-catenin组).分别给予上述4组处理因素后常规细胞培养3、6和9d提取细胞总RNA,荧光定量real-time (RT-PCR)检测核因子受体(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(Cathepsin K)及金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达,再于同样处理因素培养6d通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察Raw264.7的分化情况;Western blot检测TRAP、Cathepsin K蛋白的表达.结果 RT-PCR检测Ad-β-catenin组能下调RANK、TRAP、Cathepsin K和MMP-9 mRNA的表达;TRAP染色显示50 ng/mL RANKL诱导组能成功诱导Raw264.7成多核细胞,空白组和Ad-GFP组有个别多核细胞,Ad-β-catenin组为单核细胞;Western blot检测显示Ad-β-catenin组TRAP、Cathepsin K蛋白表达降低(P＜0.05).结论 Wnt/β-catenin信号途径能抑制RAW264.7分化成熟为破骨细胞.
목적 료해Wnt/β-catenin신호도경대소서단핵/거서세포Raw264.7적분화조공.방법 장세포분위4조:음성대조조(즉공Raw264.7조)、실험대조조(즉감염Ad-GFP조)、양성대조조(즉50 ng/mL RANKL유도조)화실험조(즉감염Ad-β-catenin조).분별급여상술4조처리인소후상규세포배양3、6화9d제취세포총RNA,형광정량real-time (RT-PCR)검측핵인자수체(RANK)、항주석산산성린산매(TRAP)、조직단백매K(Cathepsin K)급금속단백매-9(MMP-9)mRNA적표체,재우동양처리인소배양6d통과주석산항산성린산매(TRAP)염색관찰Raw264.7적분화정황;Western blot검측TRAP、Cathepsin K단백적표체.결과 RT-PCR검측Ad-β-catenin조능하조RANK、TRAP、Cathepsin K화MMP-9 mRNA적표체;TRAP염색현시50 ng/mL RANKL유도조능성공유도Raw264.7성다핵세포,공백조화Ad-GFP조유개별다핵세포,Ad-β-catenin조위단핵세포;Western blot검측현시Ad-β-catenin조TRAP、Cathepsin K단백표체강저(P＜0.05).결론 Wnt/β-catenin신호도경능억제RAW264.7분화성숙위파골세포.