基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
9期
1118-1122
,共5页
陈明%毕琳琳%赵芳%王智泉%干学东%王扬淦
陳明%畢琳琳%趙芳%王智泉%榦學東%王颺淦
진명%필림림%조방%왕지천%간학동%왕양감
胚胎干细胞%心肌细胞%贴壁%Src激酶
胚胎榦細胞%心肌細胞%貼壁%Src激酶
배태간세포%심기세포%첩벽%Src격매
embryonic stem cell%cardiomyocyte%adhesion%Src kinase
目的 观察拟胚体(EB)贴壁时间对小鼠胚胎干细胞(ESC)心肌分化的影响并研究其机制.方法 用悬滴培养法促进ESCs形成EBs.EBs在不同的分化天数贴壁,观察搏动EBs百分比,RT-PCR检测Nkx2.5,GATA4和β-MHC mRNA表达,Western blot检测Src家族酪氨酸激酶磷酸化水平.结果 分化第3,4天贴壁组搏动EB百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC表达水平显著低于分化第5,6和7天贴壁组(P ＜0.05);EB贴壁能够使Src激酶磷酸化水平升高,Src激酶阻断PP2能够抑制贴壁诱发的Src激酶磷酸化水平升高(P＜0.05);对于分化第4天贴壁组,在分化第4～6天使用PP2能够增加搏动EBs百分比及β-MHC表达水平(P＜0.05).结论 EB贴壁时间是影响ESC心肌分化的一个重要因素.在分化第4天或者之前贴壁可以显著抑制心肌分化,其机制可能是EB贴壁激活了Src激酶.
目的 觀察擬胚體(EB)貼壁時間對小鼠胚胎榦細胞(ESC)心肌分化的影響併研究其機製.方法 用懸滴培養法促進ESCs形成EBs.EBs在不同的分化天數貼壁,觀察搏動EBs百分比,RT-PCR檢測Nkx2.5,GATA4和β-MHC mRNA錶達,Western blot檢測Src傢族酪氨痠激酶燐痠化水平.結果 分化第3,4天貼壁組搏動EB百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC錶達水平顯著低于分化第5,6和7天貼壁組(P ＜0.05);EB貼壁能夠使Src激酶燐痠化水平升高,Src激酶阻斷PP2能夠抑製貼壁誘髮的Src激酶燐痠化水平升高(P＜0.05);對于分化第4天貼壁組,在分化第4～6天使用PP2能夠增加搏動EBs百分比及β-MHC錶達水平(P＜0.05).結論 EB貼壁時間是影響ESC心肌分化的一箇重要因素.在分化第4天或者之前貼壁可以顯著抑製心肌分化,其機製可能是EB貼壁激活瞭Src激酶.
목적 관찰의배체(EB)첩벽시간대소서배태간세포(ESC)심기분화적영향병연구기궤제.방법 용현적배양법촉진ESCs형성EBs.EBs재불동적분화천수첩벽,관찰박동EBs백분비,RT-PCR검측Nkx2.5,GATA4화β-MHC mRNA표체,Western blot검측Src가족락안산격매린산화수평.결과 분화제3,4천첩벽조박동EB백분비급Nkx2.5,GATA4,β-MHC표체수평현저저우분화제5,6화7천첩벽조(P ＜0.05);EB첩벽능구사Src격매린산화수평승고,Src격매조단PP2능구억제첩벽유발적Src격매린산화수평승고(P＜0.05);대우분화제4천첩벽조,재분화제4～6천사용PP2능구증가박동EBs백분비급β-MHC표체수평(P＜0.05).결론 EB첩벽시간시영향ESC심기분화적일개중요인소.재분화제4천혹자지전첩벽가이현저억제심기분화,기궤제가능시EB첩벽격활료Src격매.
