基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
9期
1085-1090
,共6页
张曦%钟梁%高远梅%胡秀秀%王慧%朱新瑜%刘北忠
張晞%鐘樑%高遠梅%鬍秀秀%王慧%硃新瑜%劉北忠
장희%종량%고원매%호수수%왕혜%주신유%류북충
GINS2基因%HL60细胞%G2期阻滞%白血病
GINS2基因%HL60細胞%G2期阻滯%白血病
GINS2기인%HL60세포%G2기조체%백혈병
GINS2 gene%HL60 cell%G2 arrest%leukemia
目的 观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制.方法 脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为于扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组.集落形成实验测定细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;3 H-TdR掺人实验检测细胞DNA合成;Western blot检测CDK1、cyclinB1等蛋白;RT-PCR检测ATM,CHK2,P53等mRNA水平;Western blot检测其蛋白水平.结果 和其他3组相比,干扰组细胞G2期细胞数明显增加、DNA合成受阻、增殖减慢.与G2期相关周期调控蛋白CDK1,cyclinB1的表达随时间变化而明显降低.和其他3组相比,干扰组细胞ATM,CHK2,P53转录水平和翻译水平显著上调.结论 下调GINS2表达后可抑制HL60细胞DNA复制并影响其G2期进程,机制可能与ATM,CHK2,P53等基因相关.
目的 觀察下調GINS2的錶達後對人白血病細胞繫HL60週期調控因子的變化併探討其機製.方法 脂質體介導併穩定轉染榦擾質粒的細胞為于擾組,轉染陰性對照質粒的細胞為陰性對照組,隻加入脂質體的細胞為空白對照組,未轉染的HL60細胞為未處理組.集落形成實驗測定細胞增殖;流式細胞術分析細胞週期;3 H-TdR摻人實驗檢測細胞DNA閤成;Western blot檢測CDK1、cyclinB1等蛋白;RT-PCR檢測ATM,CHK2,P53等mRNA水平;Western blot檢測其蛋白水平.結果 和其他3組相比,榦擾組細胞G2期細胞數明顯增加、DNA閤成受阻、增殖減慢.與G2期相關週期調控蛋白CDK1,cyclinB1的錶達隨時間變化而明顯降低.和其他3組相比,榦擾組細胞ATM,CHK2,P53轉錄水平和翻譯水平顯著上調.結論 下調GINS2錶達後可抑製HL60細胞DNA複製併影響其G2期進程,機製可能與ATM,CHK2,P53等基因相關.
목적 관찰하조GINS2적표체후대인백혈병세포계HL60주기조공인자적변화병탐토기궤제.방법 지질체개도병은정전염간우질립적세포위우우조,전염음성대조질립적세포위음성대조조,지가입지질체적세포위공백대조조,미전염적HL60세포위미처리조.집락형성실험측정세포증식;류식세포술분석세포주기;3 H-TdR참인실험검측세포DNA합성;Western blot검측CDK1、cyclinB1등단백;RT-PCR검측ATM,CHK2,P53등mRNA수평;Western blot검측기단백수평.결과 화기타3조상비,간우조세포G2기세포수명현증가、DNA합성수조、증식감만.여G2기상관주기조공단백CDK1,cyclinB1적표체수시간변화이명현강저.화기타3조상비,간우조세포ATM,CHK2,P53전록수평화번역수평현저상조.결론 하조GINS2표체후가억제HL60세포DNA복제병영향기G2기진정,궤제가능여ATM,CHK2,P53등기인상관.
