基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
10期
1229-1234
,共6页
王小莉%李大哲%胡培%李东升
王小莉%李大哲%鬍培%李東升
왕소리%리대철%호배%리동승
修饰mRNA%hUC-MSC%转染效率
脩飾mRNA%hUC-MSC%轉染效率
수식mRNA%hUC-MSC%전염효솔
modified mRNA%hUC-MSC%transfection efficiency
目的 探讨体外合成修饰的mRNA能否稳定高效的转入人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)中,为利用mRNA诱导分化hUC-MSC进行细胞治疗奠定基础.方法 体外构建合成mRNA的模板并合成eGFP的修饰mRNA,将其转入hUC-MSCs,流式检测转染效率、最佳转染剂量及mRNA在细胞中的半衰期.相同方法合成hPdx1修饰mRNA转染hUC-MSCs,免疫荧光检测转染效果.结果 体外合成的eGFP修饰mRNA可高效转入hUC-MSCs,最佳转染剂量为1.5 μg/mL,转染后翻译的蛋白在细胞中可稳定存在3d.hPdx1的修饰mRNA也可稳定地导入hUC-MSCs.结论 体外合成的修饰mRNA稳定性好,可进入细胞并翻译成蛋白.
目的 探討體外閤成脩飾的mRNA能否穩定高效的轉入人臍帶間充質榦細胞(hUC-MSC)中,為利用mRNA誘導分化hUC-MSC進行細胞治療奠定基礎.方法 體外構建閤成mRNA的模闆併閤成eGFP的脩飾mRNA,將其轉入hUC-MSCs,流式檢測轉染效率、最佳轉染劑量及mRNA在細胞中的半衰期.相同方法閤成hPdx1脩飾mRNA轉染hUC-MSCs,免疫熒光檢測轉染效果.結果 體外閤成的eGFP脩飾mRNA可高效轉入hUC-MSCs,最佳轉染劑量為1.5 μg/mL,轉染後翻譯的蛋白在細胞中可穩定存在3d.hPdx1的脩飾mRNA也可穩定地導入hUC-MSCs.結論 體外閤成的脩飾mRNA穩定性好,可進入細胞併翻譯成蛋白.
목적 탐토체외합성수식적mRNA능부은정고효적전입인제대간충질간세포(hUC-MSC)중,위이용mRNA유도분화hUC-MSC진행세포치료전정기출.방법 체외구건합성mRNA적모판병합성eGFP적수식mRNA,장기전입hUC-MSCs,류식검측전염효솔、최가전염제량급mRNA재세포중적반쇠기.상동방법합성hPdx1수식mRNA전염hUC-MSCs,면역형광검측전염효과.결과 체외합성적eGFP수식mRNA가고효전입hUC-MSCs,최가전염제량위1.5 μg/mL,전염후번역적단백재세포중가은정존재3d.hPdx1적수식mRNA야가은정지도입hUC-MSCs.결론 체외합성적수식mRNA은정성호,가진입세포병번역성단백.