非洲猪瘟病毒p54蛋白的高效表达及在ELISA中的应用
비주저온병독p54단백적고효표체급재ELISA중적응용
Studies on the Efficient Expression of African Swine Fever Virus p54 Protein and Its Antigenic Analysis in ELISA
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2013年 11期 1832-1837 ,共6页

    龚振华%王丽萍%臧京帅%张康%刘春菊%吴晓东%张启迪%秦晓冰%陈琳琳

    공진화%왕려평%장경수%장강%류춘국%오효동%장계적%진효빙%진림림

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    비주저온병독%p54단백%ELISA
    African swine fever virus%p54 protein%ELISA
    本研究旨在高效原核表达非洲猪瘟病毒(ASFV) p54蛋白,并进一步将其用于ELISA试验研究.参考非洲猪瘟病毒Con09/Bzz020株P54基因(E183L)的核苷酸序列,通过序列优化后合成P54基因,克隆至表达载体pET-30c(+),构建重组质粒pET-30c(+)-p54.结果显示,pET-30c(+)-p54有完整的阅读框架,可高效表达分子量约20.7 ku的p54蛋白,该蛋白表达稳定,具有可溶性,易于纯化,纯度高达900 μg·mL-1,所表达的p54蛋白的氨基酸序列与Con09/Bzz020株p54蛋白氨基酸序列相同;Western blot试验显示,表达的p54蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性反应;ELISA试验显示,p54蛋白针对ASFV阳性血清和阴性血清的P/N值为4.67.研究结果证实p54蛋白表达产量高,易于纯化,具有较好的抗原性,可用于非洲猪瘟ELISA诊断.
    본연구지재고효원핵표체비주저온병독(ASFV) p54단백,병진일보장기용우ELISA시험연구.삼고비주저온병독Con09/Bzz020주P54기인(E183L)적핵감산서렬,통과서렬우화후합성P54기인,극륭지표체재체pET-30c(+),구건중조질립pET-30c(+)-p54.결과현시,pET-30c(+)-p54유완정적열독광가,가고효표체분자량약20.7 ku적p54단백,해단백표체은정,구유가용성,역우순화,순도고체900 μg·mL-1,소표체적p54단백적안기산서렬여Con09/Bzz020주p54단백안기산서렬상동;Western blot시험현시,표체적p54단백능여ASFV양성혈청발생특이성반응;ELISA시험현시,p54단백침대ASFV양성혈청화음성혈청적P/N치위4.67.연구결과증실p54단백표체산량고,역우순화,구유교호적항원성,가용우비주저온ELISA진단.
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