实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2014年
2期
113-119
,共7页
黄虎%杨凡%吴茂柏%张玉杰%钟翎%侯永敏
黃虎%楊凡%吳茂柏%張玉傑%鐘翎%侯永敏
황호%양범%오무백%장옥걸%종령%후영민
重组绒毛膜促性腺激素(γhCG)%Fc融合蛋白%长效%药代动力学
重組絨毛膜促性腺激素(γhCG)%Fc融閤蛋白%長效%藥代動力學
중조융모막촉성선격소(γhCG)%Fc융합단백%장효%약대동역학
Recombinant human chorionic gonadotropin (rhCG)%Fc fusion protein%Long Acting%Pharmacokinetics
目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3'端,构建hCG-Fc表达载体并将其稳定表达在哺乳动物细胞,通过无血清悬浮细胞培养和基于亲和层析的蛋白纯化,制备了新型重组hCG-Fc融合蛋白.检测其分子量、ELISA免疫活性和体内生物活性,并测定其在大鼠体内血循环半衰期.结果 重组融合蛋白分子量与理论推断值相当,ELISA活性为2 965 IU/mg,体内生物活性为2 288 IU/mg,消除半衰期为174 h.结论 hCG-Fc融合蛋白构建表达成功,且具有显著的体内外活性,药代动力学分析显示hCG-Fc重组融合蛋白半衰期是重组hCG的近6倍.这种新型长效融合蛋白在临床上可大大减少注射次数,提高患者用药依从性,具有显著的社会和经济效益.
目的 構建含有Fc片段的絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型長效重組hCG-Fc融閤蛋白,可顯著延長其在血液中的半衰期,有利于提高患者用藥依從性.方法 首次將Fc DNA片段有序連接到hCG基因3'耑,構建hCG-Fc錶達載體併將其穩定錶達在哺乳動物細胞,通過無血清懸浮細胞培養和基于親和層析的蛋白純化,製備瞭新型重組hCG-Fc融閤蛋白.檢測其分子量、ELISA免疫活性和體內生物活性,併測定其在大鼠體內血循環半衰期.結果 重組融閤蛋白分子量與理論推斷值相噹,ELISA活性為2 965 IU/mg,體內生物活性為2 288 IU/mg,消除半衰期為174 h.結論 hCG-Fc融閤蛋白構建錶達成功,且具有顯著的體內外活性,藥代動力學分析顯示hCG-Fc重組融閤蛋白半衰期是重組hCG的近6倍.這種新型長效融閤蛋白在臨床上可大大減少註射次數,提高患者用藥依從性,具有顯著的社會和經濟效益.
목적 구건함유Fc편단적융모막촉성선격소(human chorionic gonadotropin,hCG)신형장효중조hCG-Fc융합단백,가현저연장기재혈액중적반쇠기,유리우제고환자용약의종성.방법 수차장Fc DNA편단유서련접도hCG기인3'단,구건hCG-Fc표체재체병장기은정표체재포유동물세포,통과무혈청현부세포배양화기우친화층석적단백순화,제비료신형중조hCG-Fc융합단백.검측기분자량、ELISA면역활성화체내생물활성,병측정기재대서체내혈순배반쇠기.결과 중조융합단백분자량여이론추단치상당,ELISA활성위2 965 IU/mg,체내생물활성위2 288 IU/mg,소제반쇠기위174 h.결론 hCG-Fc융합단백구건표체성공,차구유현저적체내외활성,약대동역학분석현시hCG-Fc중조융합단백반쇠기시중조hCG적근6배.저충신형장효융합단백재림상상가대대감소주사차수,제고환자용약의종성,구유현저적사회화경제효익.
