中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
2期
194-199
,共6页
许庆芳%侯巍%郑跃%刘晨%龚子鉴%陆春%赖维
許慶芳%侯巍%鄭躍%劉晨%龔子鑒%陸春%賴維
허경방%후외%정약%류신%공자감%륙춘%뢰유
SP600125%c-Jun氨基末端激酶通路%UVA%皮肤成纤维细胞%光老化
SP600125%c-Jun氨基末耑激酶通路%UVA%皮膚成纖維細胞%光老化
SP600125%c-Jun안기말단격매통로%UVA%피부성섬유세포%광노화
SP600125%c-Jun N-terminal kinase signaling pathway%UVA%dermal fibroblasts%photoaging
[目的]研究抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳SP600125浓度,为研究JNK信号通路在光老化中的作用机制奠定基础.[方法]原代培养取自儿童包皮的皮肤成纤维细胞.用CCK-8法结合荧光倒置显微镜研究不同剂量UVA和不同浓度SP600125及两者联合对皮肤成纤维细胞活性和形态的影响,以选择非细胞毒性的UVA剂量和SP600125浓度.再用Western-blot检测UVA辐照后不同时间点皮肤成纤维细胞中磷酸化c-Jun(P-c-Jun)表达以确定其被诱导表达的时间点.最后用Western-blot检测不同浓度SP600125对UVA上调的P-c-Jun表达的抑制.[结果]UVA和SP600125分别辐照细胞和孵育细胞时,UVA≤10 J/cm2和SP600125≤2μmol/L均能保持细胞活性在90％以上.10 J/cm2的UVA辐照不同浓度SP600125孵育的细胞时,≤800 nmol/L的SP600125孵育的细胞活性在90％以上;1μmol/L的SP600125使细胞活性明显下降至67.1％,镜下见部分细胞皱缩、碎裂、死亡;2μmol/L的SP600125使细胞活性进一步下降至7.6％,镜下见绝大部分细胞变形、碎裂、死亡.Western-blot结果显示P-c-Jun在UVA辐照后0.75 h、1.5 h均较0h升高,3h后恢复至0h水平.200 ～ 800 nmol/L SP600125呈剂量依赖性地抑制UVA上调的P-c-Jun表达,差异有统计学意义.[结论]低于常用浓度的200～ 800 nmol/L SP600125即可抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞的JNK通路.JNK通路可能在UVA辐照的皮肤成纤维细胞中起抗凋亡作用.
[目的]研究抑製UVA激活的皮膚成纖維細胞JNK通路的最佳SP600125濃度,為研究JNK信號通路在光老化中的作用機製奠定基礎.[方法]原代培養取自兒童包皮的皮膚成纖維細胞.用CCK-8法結閤熒光倒置顯微鏡研究不同劑量UVA和不同濃度SP600125及兩者聯閤對皮膚成纖維細胞活性和形態的影響,以選擇非細胞毒性的UVA劑量和SP600125濃度.再用Western-blot檢測UVA輻照後不同時間點皮膚成纖維細胞中燐痠化c-Jun(P-c-Jun)錶達以確定其被誘導錶達的時間點.最後用Western-blot檢測不同濃度SP600125對UVA上調的P-c-Jun錶達的抑製.[結果]UVA和SP600125分彆輻照細胞和孵育細胞時,UVA≤10 J/cm2和SP600125≤2μmol/L均能保持細胞活性在90％以上.10 J/cm2的UVA輻照不同濃度SP600125孵育的細胞時,≤800 nmol/L的SP600125孵育的細胞活性在90％以上;1μmol/L的SP600125使細胞活性明顯下降至67.1％,鏡下見部分細胞皺縮、碎裂、死亡;2μmol/L的SP600125使細胞活性進一步下降至7.6％,鏡下見絕大部分細胞變形、碎裂、死亡.Western-blot結果顯示P-c-Jun在UVA輻照後0.75 h、1.5 h均較0h升高,3h後恢複至0h水平.200 ～ 800 nmol/L SP600125呈劑量依賴性地抑製UVA上調的P-c-Jun錶達,差異有統計學意義.[結論]低于常用濃度的200～ 800 nmol/L SP600125即可抑製UVA激活的皮膚成纖維細胞的JNK通路.JNK通路可能在UVA輻照的皮膚成纖維細胞中起抗凋亡作用.
[목적]연구억제UVA격활적피부성섬유세포JNK통로적최가SP600125농도,위연구JNK신호통로재광노화중적작용궤제전정기출.[방법]원대배양취자인동포피적피부성섬유세포.용CCK-8법결합형광도치현미경연구불동제량UVA화불동농도SP600125급량자연합대피부성섬유세포활성화형태적영향,이선택비세포독성적UVA제량화SP600125농도.재용Western-blot검측UVA복조후불동시간점피부성섬유세포중린산화c-Jun(P-c-Jun)표체이학정기피유도표체적시간점.최후용Western-blot검측불동농도SP600125대UVA상조적P-c-Jun표체적억제.[결과]UVA화SP600125분별복조세포화부육세포시,UVA≤10 J/cm2화SP600125≤2μmol/L균능보지세포활성재90％이상.10 J/cm2적UVA복조불동농도SP600125부육적세포시,≤800 nmol/L적SP600125부육적세포활성재90％이상;1μmol/L적SP600125사세포활성명현하강지67.1％,경하견부분세포추축、쇄렬、사망;2μmol/L적SP600125사세포활성진일보하강지7.6％,경하견절대부분세포변형、쇄렬、사망.Western-blot결과현시P-c-Jun재UVA복조후0.75 h、1.5 h균교0h승고,3h후회복지0h수평.200 ～ 800 nmol/L SP600125정제량의뢰성지억제UVA상조적P-c-Jun표체,차이유통계학의의.[결론]저우상용농도적200～ 800 nmol/L SP600125즉가억제UVA격활적피부성섬유세포적JNK통로.JNK통로가능재UVA복조적피부성섬유세포중기항조망작용.
