CAJ | 학술논문

[目的]探讨丙酮酸乙酯(EP)抑制脓毒症巨噬细胞表达和释放HMGB1的相关分子机制.[方法]将小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7分为LPS和LPS+ EP组,分别采用100 ng/mL LPS和100 ng/mL LPS+5 mmol/L EP刺激,于刺激后不同的时间点,Western blot检测细胞总蛋白内p-p38MAPK、CBP的含量变化以及胞质和胞核内NF-κB的含量;用免疫细胞化学、激光共聚焦显微镜观察培养细胞内p-p38MAPK、NF-κB和CBP的变化;Real-time PCR检测培养细胞HMGB1的mRNA水平,ELISA检测培养上清HMGB1的蛋白含量.[结果]LPS和LPS+ EP刺激后2～6 h,细胞内p-p38MAPK蛋白含量逐渐增加,但LPS+ EP组p-p38MAPK蛋白含量明显低于LPS组;NF-κB在细胞质内的含量逐渐减少,而在细胞核内的含量逐渐增多,而LPS+ EP组NF-κB从胞质到胞核的移位明显弱于LPS组;细胞内CBP的蛋白含量逐渐增加,但LPS+ EP组明显低于LPS组.随着p-p38MAPK、NF-κB和CBP等蛋白的变化,LPS和LPS+ EP刺激后24、36和48 h,LPS+ EP组细胞内HMGB1mRNA表达比LPS组明显减少;在LPS和LPS+ EP刺激后18～48h,LPS+ EP组培养上清中HMGB1蛋白含量明显低于LPS组.[结论]EP通过抑制单核-巨噬细胞内的信号分子p-p38MAPK、NF-κB、和CBP的表达,从而抑制LPS诱导单核-巨噬细胞表达和释放HMGB1.
[목적]탐토병동산을지(EP)억제농독증거서세포표체화석방HMGB1적상관분자궤제.[방법]장소서복강거서세포주RAW264.7분위LPS화LPS+ EP조,분별채용100 ng/mL LPS화100 ng/mL LPS+5 mmol/L EP자격,우자격후불동적시간점,Western blot검측세포총단백내p-p38MAPK、CBP적함량변화이급포질화포핵내NF-κB적함량;용면역세포화학、격광공취초현미경관찰배양세포내p-p38MAPK、NF-κB화CBP적변화;Real-time PCR검측배양세포HMGB1적mRNA수평,ELISA검측배양상청HMGB1적단백함량.[결과]LPS화LPS+ EP자격후2～6 h,세포내p-p38MAPK단백함량축점증가,단LPS+ EP조p-p38MAPK단백함량명현저우LPS조;NF-κB재세포질내적함량축점감소,이재세포핵내적함량축점증다,이LPS+ EP조NF-κB종포질도포핵적이위명현약우LPS조;세포내CBP적단백함량축점증가,단LPS+ EP조명현저우LPS조.수착p-p38MAPK、NF-κB화CBP등단백적변화,LPS화LPS+ EP자격후24、36화48 h,LPS+ EP조세포내HMGB1mRNA표체비LPS조명현감소;재LPS화LPS+ EP자격후18～48h,LPS+ EP조배양상청중HMGB1단백함량명현저우LPS조.[결론]EP통과억제단핵-거서세포내적신호분자p-p38MAPK、NF-κB、화CBP적표체,종이억제LPS유도단핵-거서세포표체화석방HMGB1.