中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
2期
169-176
,共8页
李佳成%郭燕珊%屠美%吴昊%郑力恒%张嘉晴
李佳成%郭燕珊%屠美%吳昊%鄭力恆%張嘉晴
리가성%곽연산%도미%오호%정력항%장가청
脂肪干细胞%胚胎干细胞%条件培养基%分化
脂肪榦細胞%胚胎榦細胞%條件培養基%分化
지방간세포%배태간세포%조건배양기%분화
adipose derived stem cell%embryonic stem cell%conditioned medium%differentiation
[目的]探究小鼠胚胎干细胞(ESC)条件培养基(CM)对人类脂肪干细胞(ADSC)增殖速率的促进作用,并研究CM对ADSC表面标志表达以及成骨成脂分化的影响.[方法]胶原酶Ⅰ消化法提取人ADSC.培养2代后分普通组、40%CM组和40%ES组,分别以普通ADSC培养液、普通ADSC培养液加40%CM和普通ADSC培养液加40%ES培养液处理.3代后,用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测实验前后细胞表面标志的表达;诱导其向成骨成脂分化并鉴定.[结果]MTT法检测,40%CM组MTT吸光值显著高于ADSC组(P=0.012< 0.05).流式检测结果发现经CM培养后的ADSC,其阳性表达细胞表面标志CD29、CD44、CD73、CD90、CD105表达量无变化,阴性表达的表面标志CD31、CD45表达量降低,HLA-DR表达量增加.经过油红O染色和茜素红S染色,成脂成骨分化形成的脂滴,钙结节数目没有明显区别.[结论]ES细胞CM可以促进ADSC体外扩增,且不影响其细胞表面标志的表达及分化能力.
[目的]探究小鼠胚胎榦細胞(ESC)條件培養基(CM)對人類脂肪榦細胞(ADSC)增殖速率的促進作用,併研究CM對ADSC錶麵標誌錶達以及成骨成脂分化的影響.[方法]膠原酶Ⅰ消化法提取人ADSC.培養2代後分普通組、40%CM組和40%ES組,分彆以普通ADSC培養液、普通ADSC培養液加40%CM和普通ADSC培養液加40%ES培養液處理.3代後,用MTT法檢測細胞增殖活性,流式細胞儀檢測實驗前後細胞錶麵標誌的錶達;誘導其嚮成骨成脂分化併鑒定.[結果]MTT法檢測,40%CM組MTT吸光值顯著高于ADSC組(P=0.012< 0.05).流式檢測結果髮現經CM培養後的ADSC,其暘性錶達細胞錶麵標誌CD29、CD44、CD73、CD90、CD105錶達量無變化,陰性錶達的錶麵標誌CD31、CD45錶達量降低,HLA-DR錶達量增加.經過油紅O染色和茜素紅S染色,成脂成骨分化形成的脂滴,鈣結節數目沒有明顯區彆.[結論]ES細胞CM可以促進ADSC體外擴增,且不影響其細胞錶麵標誌的錶達及分化能力.
[목적]탐구소서배태간세포(ESC)조건배양기(CM)대인류지방간세포(ADSC)증식속솔적촉진작용,병연구CM대ADSC표면표지표체이급성골성지분화적영향.[방법]효원매Ⅰ소화법제취인ADSC.배양2대후분보통조、40%CM조화40%ES조,분별이보통ADSC배양액、보통ADSC배양액가40%CM화보통ADSC배양액가40%ES배양액처리.3대후,용MTT법검측세포증식활성,류식세포의검측실험전후세포표면표지적표체;유도기향성골성지분화병감정.[결과]MTT법검측,40%CM조MTT흡광치현저고우ADSC조(P=0.012< 0.05).류식검측결과발현경CM배양후적ADSC,기양성표체세포표면표지CD29、CD44、CD73、CD90、CD105표체량무변화,음성표체적표면표지CD31、CD45표체량강저,HLA-DR표체량증가.경과유홍O염색화천소홍S염색,성지성골분화형성적지적,개결절수목몰유명현구별.[결론]ES세포CM가이촉진ADSC체외확증,차불영향기세포표면표지적표체급분화능력.