江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
5期
1102-1106
,共5页
刘莉%林嘉鹏%吴阳升%汪立芹%田永芝%黄俊成
劉莉%林嘉鵬%吳暘升%汪立芹%田永芝%黃俊成
류리%림가붕%오양승%왕립근%전영지%황준성
Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒%基因转染%载体
Mg2Al-Cl-LDH納米顆粒%基因轉染%載體
Mg2Al-Cl-LDH납미과립%기인전염%재체
Mg2Al-Cl-LDH nanoparticle%gene transfection%carrier
为探讨Mg2Al-Cl-LDH颗粒作为基因转染载体的可能性以及最优的转染体系和转染时间,为后续的基因治疗、创面修复、转基因技术等试验打下基础,自制Mg2 Al-Cl-LDH纳米颗粒,与增强型荧光蛋白质基因eGF结合后,转染入细胞,观察转染后细胞表达的绿色荧光蛋白质,计算转染率.结果表明Mg2 Al-Cl-LDH纳米颗粒直径在100 nm左右,结构为六边形.200 μg/ml的纳米颗粒浓度下细胞活性为87%,达到500 μg/ml时细胞活性快速降至44%;DNA与LDH的质量比为4/50时转染率达到11.17%,质量比为10/50时,转染效率为3.93%;DNA与LDH作用时间在15 min时转染率为6.93%,30 min时反而下降至4.8%;转染细胞培养24 h时转染率达到17.4%,72 h后下降至3.7%.纳米颗粒的分子较小,比较容易被细胞膜胞吞,并且Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒能有效地与eGFP质粒相结合;在DNA与LDH质量比4/50的情况下,结合能力最高;最佳结合时间为15 min;转染时间在48 h时效果最好.HEK 293T细胞对Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒的最优耐受浓度为200 μg/ml;同样条件下C2C12细胞的转染效率比HEK 293T细胞的转染效率高.
為探討Mg2Al-Cl-LDH顆粒作為基因轉染載體的可能性以及最優的轉染體繫和轉染時間,為後續的基因治療、創麵脩複、轉基因技術等試驗打下基礎,自製Mg2 Al-Cl-LDH納米顆粒,與增彊型熒光蛋白質基因eGF結閤後,轉染入細胞,觀察轉染後細胞錶達的綠色熒光蛋白質,計算轉染率.結果錶明Mg2 Al-Cl-LDH納米顆粒直徑在100 nm左右,結構為六邊形.200 μg/ml的納米顆粒濃度下細胞活性為87%,達到500 μg/ml時細胞活性快速降至44%;DNA與LDH的質量比為4/50時轉染率達到11.17%,質量比為10/50時,轉染效率為3.93%;DNA與LDH作用時間在15 min時轉染率為6.93%,30 min時反而下降至4.8%;轉染細胞培養24 h時轉染率達到17.4%,72 h後下降至3.7%.納米顆粒的分子較小,比較容易被細胞膜胞吞,併且Mg2Al-Cl-LDH納米顆粒能有效地與eGFP質粒相結閤;在DNA與LDH質量比4/50的情況下,結閤能力最高;最佳結閤時間為15 min;轉染時間在48 h時效果最好.HEK 293T細胞對Mg2Al-Cl-LDH納米顆粒的最優耐受濃度為200 μg/ml;同樣條件下C2C12細胞的轉染效率比HEK 293T細胞的轉染效率高.
위탐토Mg2Al-Cl-LDH과립작위기인전염재체적가능성이급최우적전염체계화전염시간,위후속적기인치료、창면수복、전기인기술등시험타하기출,자제Mg2 Al-Cl-LDH납미과립,여증강형형광단백질기인eGF결합후,전염입세포,관찰전염후세포표체적록색형광단백질,계산전염솔.결과표명Mg2 Al-Cl-LDH납미과립직경재100 nm좌우,결구위륙변형.200 μg/ml적납미과립농도하세포활성위87%,체도500 μg/ml시세포활성쾌속강지44%;DNA여LDH적질량비위4/50시전염솔체도11.17%,질량비위10/50시,전염효솔위3.93%;DNA여LDH작용시간재15 min시전염솔위6.93%,30 min시반이하강지4.8%;전염세포배양24 h시전염솔체도17.4%,72 h후하강지3.7%.납미과립적분자교소,비교용역피세포막포탄,병차Mg2Al-Cl-LDH납미과립능유효지여eGFP질립상결합;재DNA여LDH질량비4/50적정황하,결합능력최고;최가결합시간위15 min;전염시간재48 h시효과최호.HEK 293T세포대Mg2Al-Cl-LDH납미과립적최우내수농도위200 μg/ml;동양조건하C2C12세포적전염효솔비HEK 293T세포적전염효솔고.