解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
5期
646-650
,共5页
李琼%杨慈清%郭志坤%左红波%李慈霞%李和
李瓊%楊慈清%郭誌坤%左紅波%李慈霞%李和
리경%양자청%곽지곤%좌홍파%리자하%리화
脂肪间充质干细胞%细胞分化%细胞增殖%细胞衰老%低温保存%免疫荧光%实时定量PCR
脂肪間充質榦細胞%細胞分化%細胞增殖%細胞衰老%低溫保存%免疫熒光%實時定量PCR
지방간충질간세포%세포분화%세포증식%세포쇠로%저온보존%면역형광%실시정량PCR
Adipose-derived mesenchymal stem cell%Cell differentiation%Cell proliferation%Cell senescence%Cryopreservation%Immunofluorescence%Real time-PCR
目的 探讨低温保存对小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)体外培养的生物学特性和分化潜能的影响.方法 分离、培养小鼠ADMSCs,取第3代细胞置于液氮深低温(-196℃)冻存12个月后复苏.MTT法测定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老;免疫细胞化学方法检测细胞表面分子CD73、CD90和CD105;条件培养基诱导后,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白(cTnT),茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色检测成骨、成脂诱导分化潜能,Real time-PCR检测cTnT、Gata4、Ost和Runx2.未经低温保存的第3代ADMSCs为对照.结果 低温保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率与未冻存细胞比较差异无显著性(P＞0.05).诱导后ADMSCs的cTnT阳性表达、茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色呈阳性反应,冻存组与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 低温保存对ADMSCs体外生长特性和成心肌、成脂肪细胞、成骨细胞的分化潜能差异无显著性.
目的 探討低溫保存對小鼠脂肪間充質榦細胞(ADMSCs)體外培養的生物學特性和分化潛能的影響.方法 分離、培養小鼠ADMSCs,取第3代細胞置于液氮深低溫(-196℃)凍存12箇月後複囌.MTT法測定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色檢測衰老;免疫細胞化學方法檢測細胞錶麵分子CD73、CD90和CD105;條件培養基誘導後,免疫熒光法檢測心肌特異性肌鈣蛋白(cTnT),茜素紅、堿性燐痠酶和油紅O染色檢測成骨、成脂誘導分化潛能,Real time-PCR檢測cTnT、Gata4、Ost和Runx2.未經低溫保存的第3代ADMSCs為對照.結果 低溫保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率與未凍存細胞比較差異無顯著性(P＞0.05).誘導後ADMSCs的cTnT暘性錶達、茜素紅、堿性燐痠酶和油紅O染色呈暘性反應,凍存組與對照組比較差異無顯著性(P＞0.05).結論 低溫保存對ADMSCs體外生長特性和成心肌、成脂肪細胞、成骨細胞的分化潛能差異無顯著性.
목적 탐토저온보존대소서지방간충질간세포(ADMSCs)체외배양적생물학특성화분화잠능적영향.방법 분리、배양소서ADMSCs,취제3대세포치우액담심저온(-196℃)동존12개월후복소.MTT법측정ADMSCs적증식활성;β-반유당감매(SA-β-Gal)염색검측쇠로;면역세포화학방법검측세포표면분자CD73、CD90화CD105;조건배양기유도후,면역형광법검측심기특이성기개단백(cTnT),천소홍、감성린산매화유홍O염색검측성골、성지유도분화잠능,Real time-PCR검측cTnT、Gata4、Ost화Runx2.미경저온보존적제3대ADMSCs위대조.결과 저온보존적ADMSCs기증식활성、쇠로솔여미동존세포비교차이무현저성(P＞0.05).유도후ADMSCs적cTnT양성표체、천소홍、감성린산매화유홍O염색정양성반응,동존조여대조조비교차이무현저성(P＞0.05).결론 저온보존대ADMSCs체외생장특성화성심기、성지방세포、성골세포적분화잠능차이무현저성.
