中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2013年
20期
241-245
,共5页
沈洲%雷丽云%龙蓉%陈素%刘向明
瀋洲%雷麗雲%龍蓉%陳素%劉嚮明
침주%뢰려운%룡용%진소%류향명
剑叶龙血素A%人工抗原%多克隆抗体%酶联免疫吸附分析
劍葉龍血素A%人工抗原%多剋隆抗體%酶聯免疫吸附分析
검협룡혈소A%인공항원%다극륭항체%매련면역흡부분석
cochinchinenin A%artificial antigen%polyclonal antibody%enzyme-linked immunosorbent assay
目的:建立间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于测定剑叶龙血素A(CA)含量.方法:合成半抗原剑叶龙血素A-4'-羧甲基醚(CA-4'-CME),再用碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联制备免疫原(CA-BSA)和包被原(CA-OVA),免疫小鼠制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA法并评估其分析性能.结果:通过紫外扫描分析CA-BSA和CA-OVA的偶联比分别为18∶1和24∶1.抗血清效价最高达到12000.用四参数logistic方程拟合CA标准曲线,在分析范围0 ～0.80 mg·L-1内,相关系数(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,最低检测限0.045 mg·L-1,批内CV≤12.5％,批间CV≤14.7％,回收率92.7％ ～ 118.7％,对5种CA类似物的交叉反应率＜5.38％.此方法检测龙血竭和龙血竭总黄酮中CA含量分别为1.27％,3.08％.结论:剑叶龙血素A间接竞争ELISA法精密度、准确度和特异性均较好,可方便地用于药物检测和分析.
目的:建立間接競爭酶聯免疫吸附分析法(ELISA)用于測定劍葉龍血素A(CA)含量.方法:閤成半抗原劍葉龍血素A-4'-羧甲基醚(CA-4'-CME),再用碳二亞胺法將其與牛血清白蛋白(BSA)和鷄卵清蛋白(OVA)分彆偶聯製備免疫原(CA-BSA)和包被原(CA-OVA),免疫小鼠製備多剋隆抗體,建立間接競爭ELISA法併評估其分析性能.結果:通過紫外掃描分析CA-BSA和CA-OVA的偶聯比分彆為18∶1和24∶1.抗血清效價最高達到12000.用四參數logistic方程擬閤CA標準麯線,在分析範圍0 ～0.80 mg·L-1內,相關繫數(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,最低檢測限0.045 mg·L-1,批內CV≤12.5％,批間CV≤14.7％,迴收率92.7％ ～ 118.7％,對5種CA類似物的交扠反應率＜5.38％.此方法檢測龍血竭和龍血竭總黃酮中CA含量分彆為1.27％,3.08％.結論:劍葉龍血素A間接競爭ELISA法精密度、準確度和特異性均較好,可方便地用于藥物檢測和分析.
목적:건립간접경쟁매련면역흡부분석법(ELISA)용우측정검협룡혈소A(CA)함량.방법:합성반항원검협룡혈소A-4'-최갑기미(CA-4'-CME),재용탄이아알법장기여우혈청백단백(BSA)화계란청단백(OVA)분별우련제비면역원(CA-BSA)화포피원(CA-OVA),면역소서제비다극륭항체,건립간접경쟁ELISA법병평고기분석성능.결과:통과자외소묘분석CA-BSA화CA-OVA적우련비분별위18∶1화24∶1.항혈청효개최고체도12000.용사삼수logistic방정의합CA표준곡선,재분석범위0 ～0.80 mg·L-1내,상관계수(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,최저검측한0.045 mg·L-1,비내CV≤12.5％,비간CV≤14.7％,회수솔92.7％ ～ 118.7％,대5충CA유사물적교차반응솔＜5.38％.차방법검측룡혈갈화룡혈갈총황동중CA함량분별위1.27％,3.08％.결론:검협룡혈소A간접경쟁ELISA법정밀도、준학도화특이성균교호,가방편지용우약물검측화분석.
