农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
3期
280-288
,共9页
张国华%卢建雄%杨具田%臧荣鑫%申晓蓉%赵永清%霍生东%陈妍
張國華%盧建雄%楊具田%臧榮鑫%申曉蓉%趙永清%霍生東%陳妍
장국화%로건웅%양구전%장영흠%신효용%조영청%곽생동%진연
葡萄糖%NAD+%硫氧还蛋白互作蛋白(Txnip)%碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)%猪脂肪细胞%转录
葡萄糖%NAD+%硫氧還蛋白互作蛋白(Txnip)%碳水化閤物反應元件結閤蛋白(ChREBP)%豬脂肪細胞%轉錄
포도당%NAD+%류양환단백호작단백(Txnip)%탄수화합물반응원건결합단백(ChREBP)%저지방세포%전록
Glucose%NAD+%Thioredoxin interacting protein(Txnip)%Carbohydrate response element binding protein(ChREBP)%Porcine adipocyte%Transcription
硫氧还蛋白互作蛋白(Txnip)是一种氧化还原调节蛋白,通过与硫氧还蛋白结合抑制其活性,调节细胞的氧化还原状态,在葡萄糖和脂质稳态中起重要作用.本研究利用从3~7日龄仔猪(Sus scrofa)皮下脂肪组织分离培养的脂肪细胞,应用RNAi沉默碳水化合物反应元件结合蛋白基因(ChREBP)表达,以含0或0.1 mmol/L NAD+的葡萄糖浓度分别为0、5和15 mmol/L的培养液培养,采用实时荧光定量PCR检测Txnip及ChREBPmRNA表达,以探讨葡萄糖和含腺苷分子对猪脂肪细胞Txnip表达的影响及其转录调控途径.结果表明,葡萄糖以浓度依赖方式促进猪脂肪细胞Txnip和ChREBPmRNA表达,无糖条件下NAD+对Txnip mRNA表达没有明显影响,但葡萄糖存在时显著促进其表达.siRNA沉默脂肪细胞ChREBP表达后,葡萄糖对Txnip mRNA表达的促进作用比相同条件下培养的对照细胞有较大幅度降低;以NAD+处理后,Txnip表达在葡萄糖浓度为5和15 mmol/L时分别较对照细胞降低了91%和93%.由此说明,NAD+诱导猪脂肪细胞Txnip转录表达依赖于葡萄糖的参与,ChREBP介导葡萄糖和NAD+对TxnipmRNA表达的诱导作用.研究结果为进一步探讨ChREBP在葡萄糖和脂质稳态中的作用提供了基础.
硫氧還蛋白互作蛋白(Txnip)是一種氧化還原調節蛋白,通過與硫氧還蛋白結閤抑製其活性,調節細胞的氧化還原狀態,在葡萄糖和脂質穩態中起重要作用.本研究利用從3~7日齡仔豬(Sus scrofa)皮下脂肪組織分離培養的脂肪細胞,應用RNAi沉默碳水化閤物反應元件結閤蛋白基因(ChREBP)錶達,以含0或0.1 mmol/L NAD+的葡萄糖濃度分彆為0、5和15 mmol/L的培養液培養,採用實時熒光定量PCR檢測Txnip及ChREBPmRNA錶達,以探討葡萄糖和含腺苷分子對豬脂肪細胞Txnip錶達的影響及其轉錄調控途徑.結果錶明,葡萄糖以濃度依賴方式促進豬脂肪細胞Txnip和ChREBPmRNA錶達,無糖條件下NAD+對Txnip mRNA錶達沒有明顯影響,但葡萄糖存在時顯著促進其錶達.siRNA沉默脂肪細胞ChREBP錶達後,葡萄糖對Txnip mRNA錶達的促進作用比相同條件下培養的對照細胞有較大幅度降低;以NAD+處理後,Txnip錶達在葡萄糖濃度為5和15 mmol/L時分彆較對照細胞降低瞭91%和93%.由此說明,NAD+誘導豬脂肪細胞Txnip轉錄錶達依賴于葡萄糖的參與,ChREBP介導葡萄糖和NAD+對TxnipmRNA錶達的誘導作用.研究結果為進一步探討ChREBP在葡萄糖和脂質穩態中的作用提供瞭基礎.
류양환단백호작단백(Txnip)시일충양화환원조절단백,통과여류양환단백결합억제기활성,조절세포적양화환원상태,재포도당화지질은태중기중요작용.본연구이용종3~7일령자저(Sus scrofa)피하지방조직분리배양적지방세포,응용RNAi침묵탄수화합물반응원건결합단백기인(ChREBP)표체,이함0혹0.1 mmol/L NAD+적포도당농도분별위0、5화15 mmol/L적배양액배양,채용실시형광정량PCR검측Txnip급ChREBPmRNA표체,이탐토포도당화함선감분자대저지방세포Txnip표체적영향급기전록조공도경.결과표명,포도당이농도의뢰방식촉진저지방세포Txnip화ChREBPmRNA표체,무당조건하NAD+대Txnip mRNA표체몰유명현영향,단포도당존재시현저촉진기표체.siRNA침묵지방세포ChREBP표체후,포도당대Txnip mRNA표체적촉진작용비상동조건하배양적대조세포유교대폭도강저;이NAD+처리후,Txnip표체재포도당농도위5화15 mmol/L시분별교대조세포강저료91%화93%.유차설명,NAD+유도저지방세포Txnip전록표체의뢰우포도당적삼여,ChREBP개도포도당화NAD+대TxnipmRNA표체적유도작용.연구결과위진일보탐토ChREBP재포도당화지질은태중적작용제공료기출.