农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
1期
17-26
,共10页
姜静%田永胜%王波%刘振华%滕照军%李军%陈松林
薑靜%田永勝%王波%劉振華%滕照軍%李軍%陳鬆林
강정%전영성%왕파%류진화%등조군%리군%진송림
星斑川鲽%精子%冷冻保存%精子生理
星斑川鰈%精子%冷凍保存%精子生理
성반천접%정자%냉동보존%정자생리
Platichthys stellatus%Sperm%Cryopreservation%Sperm physiological
针对星斑川鲽(Platichthys stellatus)养殖群体中雄性个体较雌性小,产精液量低,限制了人工繁殖育苗和杂交育种开展等问题,本研究以性成熟的星斑川鲽为实验材料,对精子稀释液成分、稀释液渗透压、激活海水适宜温度和冷冻精液的适宜稀释比例等进行筛选,并用冷冻精液和鲜精分别与星斑川鲽卵进行受精和孵化实验,实验结果利用SPSS软件中单因素方差分析法和Student-Newman-Keuls进行比较分析.结果表明,利用Ts-2(37.65 g/L蔗糖+10.01 g/LKHCO3+1.21 g/L Tris碱)和SFs-4(60 g/L葡萄糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris碱)冷冻保存的精子活力最高,分别为(56.67±5.78)%和(66.67±5.77)%.利用计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)系统对星斑川鲽精子进行分析,测定了用Ts-2和SFs-4保存的冷冻精液中精子运动方式的各项参数.结果显示,测定的各项参数(曲线运动速度(curvilinear velocity,VCL)、直线运动速度(straight line velocity,VSL)、平均鞭打频率(beat cross frequency,BCF)、运动的直线性(linearity,LIN)和运动的前向性(straightness,STR)表明,利用SFs-4保存的精子各项运动参数明显高于Ts-2.利用蔗糖、KHCO3和Tris碱配制不同渗透压稀释液中,在渗透压为319.94 Pa时,精子活力最高,为(61.67±5.00)%,与鲜精相比无显著差异(P>0.05).利用3~18℃海水激活精子,结果显示,当激活海水温度在12℃时精子活力最高,与鲜精相比无显著性差异(P>0.05),而其他温度下显著低于鲜精活力(P<0.05).将解冻后的精液稀释10~40倍,与星斑川鲽卵受精,结果显示,在稀释20倍后冷冻精液的受精率最高.本研究利用Ts-2+20%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和SFs-4+20%DMSO对星斑川鲽精子成功进行冷冻保存,为星斑川鲽精子冷冻保存、种质库的建立和应用提供理论和技术依据.
針對星斑川鰈(Platichthys stellatus)養殖群體中雄性箇體較雌性小,產精液量低,限製瞭人工繁殖育苗和雜交育種開展等問題,本研究以性成熟的星斑川鰈為實驗材料,對精子稀釋液成分、稀釋液滲透壓、激活海水適宜溫度和冷凍精液的適宜稀釋比例等進行篩選,併用冷凍精液和鮮精分彆與星斑川鰈卵進行受精和孵化實驗,實驗結果利用SPSS軟件中單因素方差分析法和Student-Newman-Keuls進行比較分析.結果錶明,利用Ts-2(37.65 g/L蔗糖+10.01 g/LKHCO3+1.21 g/L Tris堿)和SFs-4(60 g/L葡萄糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris堿)冷凍保存的精子活力最高,分彆為(56.67±5.78)%和(66.67±5.77)%.利用計算機輔助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)繫統對星斑川鰈精子進行分析,測定瞭用Ts-2和SFs-4保存的冷凍精液中精子運動方式的各項參數.結果顯示,測定的各項參數(麯線運動速度(curvilinear velocity,VCL)、直線運動速度(straight line velocity,VSL)、平均鞭打頻率(beat cross frequency,BCF)、運動的直線性(linearity,LIN)和運動的前嚮性(straightness,STR)錶明,利用SFs-4保存的精子各項運動參數明顯高于Ts-2.利用蔗糖、KHCO3和Tris堿配製不同滲透壓稀釋液中,在滲透壓為319.94 Pa時,精子活力最高,為(61.67±5.00)%,與鮮精相比無顯著差異(P>0.05).利用3~18℃海水激活精子,結果顯示,噹激活海水溫度在12℃時精子活力最高,與鮮精相比無顯著性差異(P>0.05),而其他溫度下顯著低于鮮精活力(P<0.05).將解凍後的精液稀釋10~40倍,與星斑川鰈卵受精,結果顯示,在稀釋20倍後冷凍精液的受精率最高.本研究利用Ts-2+20%二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和SFs-4+20%DMSO對星斑川鰈精子成功進行冷凍保存,為星斑川鰈精子冷凍保存、種質庫的建立和應用提供理論和技術依據.
침대성반천접(Platichthys stellatus)양식군체중웅성개체교자성소,산정액량저,한제료인공번식육묘화잡교육충개전등문제,본연구이성성숙적성반천접위실험재료,대정자희석액성분、희석액삼투압、격활해수괄의온도화냉동정액적괄의희석비례등진행사선,병용냉동정액화선정분별여성반천접란진행수정화부화실험,실험결과이용SPSS연건중단인소방차분석법화Student-Newman-Keuls진행비교분석.결과표명,이용Ts-2(37.65 g/L자당+10.01 g/LKHCO3+1.21 g/L Tris감)화SFs-4(60 g/L포도당+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris감)냉동보존적정자활력최고,분별위(56.67±5.78)%화(66.67±5.77)%.이용계산궤보조정자분석(computer assisted sperm analysis,CASA)계통대성반천접정자진행분석,측정료용Ts-2화SFs-4보존적냉동정액중정자운동방식적각항삼수.결과현시,측정적각항삼수(곡선운동속도(curvilinear velocity,VCL)、직선운동속도(straight line velocity,VSL)、평균편타빈솔(beat cross frequency,BCF)、운동적직선성(linearity,LIN)화운동적전향성(straightness,STR)표명,이용SFs-4보존적정자각항운동삼수명현고우Ts-2.이용자당、KHCO3화Tris감배제불동삼투압희석액중,재삼투압위319.94 Pa시,정자활력최고,위(61.67±5.00)%,여선정상비무현저차이(P>0.05).이용3~18℃해수격활정자,결과현시,당격활해수온도재12℃시정자활력최고,여선정상비무현저성차이(P>0.05),이기타온도하현저저우선정활력(P<0.05).장해동후적정액희석10~40배,여성반천접란수정,결과현시,재희석20배후냉동정액적수정솔최고.본연구이용Ts-2+20%이갑기아풍(dimethyl sulfoxide,DMSO)화SFs-4+20%DMSO대성반천접정자성공진행냉동보존,위성반천접정자냉동보존、충질고적건립화응용제공이론화기술의거.