解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2013年
1期
56-60
,共5页
低氧%白细胞介素-1β%中脑源性干细胞%酪氨酸羟化酶%多巴胺能神经元
低氧%白細胞介素-1β%中腦源性榦細胞%酪氨痠羥化酶%多巴胺能神經元
저양%백세포개소-1β%중뇌원성간세포%락안산간화매%다파알능신경원
目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)在低氧环境下体外诱导中脑源性神经干细胞的分化.方法:分离孕12 d胎鼠中脑组织,制成单细胞悬液,先在无血清培养条件下做原代和传代培养;对原代和传代培养分化细胞分别行免疫细胞化学显色鉴定.鉴定后,传代培养的中脑源性神经干细胞按组接种于含10% FBS的DMEM/F12培养基和含10%FBS的DMEM/F12+IL-1β培养基;分别置于常氧(21% O2)和低氧(3%O2)环境下诱导分化,诱导9~11 d后行小鼠抗大鼠TH免疫细胞化学显色,并行流式细胞术检测酪氨酸羟化酶(TH)及烯醇化酶(NSE)阳性细胞率.结果:各实验组中,常氧组(对照组)、常氧+IL-Iβ组、低氧组、低氧+IL-1β组TH阳性神经元分别为3.63±0.76、11.76±0.54、15.83±1.15、23.87±1.83;NSE阳性神经元分别为19.82±0.65、29.33±0.84、41.62±1.51和60.35±1.56.各组与对照组比较,差异均有统计学意义.结论:孕12 d胚鼠腹侧中脑组织可以在体外培养传代、并能诱导分化成多巴胺能神经元;在低氧环境或低氧+IL-1β诱导下,分化率均高于常氧组,其表型更成熟.说明在低氧或低氧+IL-1β诱导下,可明显促进中脑源性干细胞分化为形态及功能成熟的多巴胺能神经元.
目的:探討白細胞介素-1β(IL-1β)在低氧環境下體外誘導中腦源性神經榦細胞的分化.方法:分離孕12 d胎鼠中腦組織,製成單細胞懸液,先在無血清培養條件下做原代和傳代培養;對原代和傳代培養分化細胞分彆行免疫細胞化學顯色鑒定.鑒定後,傳代培養的中腦源性神經榦細胞按組接種于含10% FBS的DMEM/F12培養基和含10%FBS的DMEM/F12+IL-1β培養基;分彆置于常氧(21% O2)和低氧(3%O2)環境下誘導分化,誘導9~11 d後行小鼠抗大鼠TH免疫細胞化學顯色,併行流式細胞術檢測酪氨痠羥化酶(TH)及烯醇化酶(NSE)暘性細胞率.結果:各實驗組中,常氧組(對照組)、常氧+IL-Iβ組、低氧組、低氧+IL-1β組TH暘性神經元分彆為3.63±0.76、11.76±0.54、15.83±1.15、23.87±1.83;NSE暘性神經元分彆為19.82±0.65、29.33±0.84、41.62±1.51和60.35±1.56.各組與對照組比較,差異均有統計學意義.結論:孕12 d胚鼠腹側中腦組織可以在體外培養傳代、併能誘導分化成多巴胺能神經元;在低氧環境或低氧+IL-1β誘導下,分化率均高于常氧組,其錶型更成熟.說明在低氧或低氧+IL-1β誘導下,可明顯促進中腦源性榦細胞分化為形態及功能成熟的多巴胺能神經元.
목적:탐토백세포개소-1β(IL-1β)재저양배경하체외유도중뇌원성신경간세포적분화.방법:분리잉12 d태서중뇌조직,제성단세포현액,선재무혈청배양조건하주원대화전대배양;대원대화전대배양분화세포분별행면역세포화학현색감정.감정후,전대배양적중뇌원성신경간세포안조접충우함10% FBS적DMEM/F12배양기화함10%FBS적DMEM/F12+IL-1β배양기;분별치우상양(21% O2)화저양(3%O2)배경하유도분화,유도9~11 d후행소서항대서TH면역세포화학현색,병행류식세포술검측락안산간화매(TH)급희순화매(NSE)양성세포솔.결과:각실험조중,상양조(대조조)、상양+IL-Iβ조、저양조、저양+IL-1β조TH양성신경원분별위3.63±0.76、11.76±0.54、15.83±1.15、23.87±1.83;NSE양성신경원분별위19.82±0.65、29.33±0.84、41.62±1.51화60.35±1.56.각조여대조조비교,차이균유통계학의의.결론:잉12 d배서복측중뇌조직가이재체외배양전대、병능유도분화성다파알능신경원;재저양배경혹저양+IL-1β유도하,분화솔균고우상양조,기표형경성숙.설명재저양혹저양+IL-1β유도하,가명현촉진중뇌원성간세포분화위형태급공능성숙적다파알능신경원.