CAJ | 학술논문

目的:探讨缺血后不同再灌注时间点小鼠肺未折叠蛋白反应(UPR)的变化及其意义.方法:采用C57BL/6J小鼠在体单侧左肺原位缺血/再灌注(I/R)损伤模型.实验随机分为4组(每组10只),包括假手术组(Sham组)及I/R l h、2 h、3 h组.各组实验结束后处死小鼠,留取左肺,分别检测以下指标:肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW)；光镜观察肺组织形态学改变和进行肺组织损伤评估(IQA)；电镜观察肺组织超微结构改变；RT-PCR和Western blotting法分别检测C/EBP-homologous protein(CHOP)、caspase-12、c-jun NH2-terminal kinase (JNK)和glucose regulating protein 78 (GRP78)的mRNA和蛋白表达水平；原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡.结果:与Sham组相比,I/R1h组肺W/D、TLW、IQA、CHOP、caspase-12、JNK与GRP78的mRNA和蛋白质表达水平及肺细胞凋亡指数(AI)并无明显差异(P＞ 0.05),光镜显示肺组织形态学和电镜显示肺组织超微结构均无明显变化,而I/R 2 h组和I/R3h组上述各指标与Sham组相比均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜ 0.01).在I/R 2 h和I/R 3 h组,光镜显示肺组织形态学和电镜显示肺组织超微结构均出现明显损伤性变化,尤以I/R 3 h组损伤最为明显.肺组织细胞凋亡指数分别与CHOP、caspase-12、JNK及GRP78的基因和蛋白的表达、W/D、TLW及IQA之间呈正相关关系.结论:缺血后再灌注时间超过一定限值可引起肺组织细胞发生过度的UPR.
목적:탐토결혈후불동재관주시간점소서폐미절첩단백반응(UPR)적변화급기의의.방법:채용C57BL/6J소서재체단측좌폐원위결혈/재관주(I/R)손상모형.실험수궤분위4조(매조10지),포괄가수술조(Sham조)급I/R l h、2 h、3 h조.각조실험결속후처사소서,류취좌폐,분별검측이하지표:폐습간중비(W/D)화총폐수함량(TLW)；광경관찰폐조직형태학개변화진행폐조직손상평고(IQA)；전경관찰폐조직초미결구개변；RT-PCR화Western blotting법분별검측C/EBP-homologous protein(CHOP)、caspase-12、c-jun NH2-terminal kinase (JNK)화glucose regulating protein 78 (GRP78)적mRNA화단백표체수평；원위결구말단표기법(TUNEL법)검측폐세포조망.결과:여Sham조상비,I/R1h조폐W/D、TLW、IQA、CHOP、caspase-12、JNK여GRP78적mRNA화단백질표체수평급폐세포조망지수(AI)병무명현차이(P＞ 0.05),광경현시폐조직형태학화전경현시폐조직초미결구균무명현변화,이I/R 2 h조화I/R3h조상술각지표여Sham조상비균명현승고,차이유통계학의의(P＜0.05혹P＜ 0.01).재I/R 2 h화I/R 3 h조,광경현시폐조직형태학화전경현시폐조직초미결구균출현명현손상성변화,우이I/R 3 h조손상최위명현.폐조직세포조망지수분별여CHOP、caspase-12、JNK급GRP78적기인화단백적표체、W/D、TLW급IQA지간정정상관관계.결론:결혈후재관주시간초과일정한치가인기폐조직세포발생과도적UPR.