中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
3期
7-10
,共4页
冉会玲%郎需龙%王兴龙%张瑞%钱晶%陈思%王秀然
冉會玲%郎需龍%王興龍%張瑞%錢晶%陳思%王秀然
염회령%랑수룡%왕흥룡%장서%전정%진사%왕수연
猪链球菌2型%ccpA基因%原核表达
豬鏈毬菌2型%ccpA基因%原覈錶達
저련구균2형%ccpA기인%원핵표체
原核表达猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性.采用PCR方法,扩增ccpA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21中进行诱导、表达和亲和层析纯化；经Western blotting初步评价ccpA的抗原性.重组原核表达质粒pET-28a-ccpA经双酶切及测序证明构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约38000,能被相关抗体所识别.因此,能成功在大肠杆菌中表达猪链球菌2型ccpA,为猪链球菌2型相关调节蛋白的免疫学研究奠定基础.
原覈錶達豬鏈毬菌2型分解代謝控製蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)併進行純化,通過免疫印跡反應初步鑒定重組蛋白的抗原性和特異性.採用PCR方法,擴增ccpA基因序列,剋隆至原覈錶達載體pET-28a中,轉入大腸桿菌BL21中進行誘導、錶達和親和層析純化；經Western blotting初步評價ccpA的抗原性.重組原覈錶達質粒pET-28a-ccpA經雙酶切及測序證明構建正確；錶達的重組蛋白相對分子質量約38000,能被相關抗體所識彆.因此,能成功在大腸桿菌中錶達豬鏈毬菌2型ccpA,為豬鏈毬菌2型相關調節蛋白的免疫學研究奠定基礎.
원핵표체저련구균2형분해대사공제단백A(catabolite control protein A,ccpA)병진행순화,통과면역인적반응초보감정중조단백적항원성화특이성.채용PCR방법,확증ccpA기인서렬,극륭지원핵표체재체pET-28a중,전입대장간균BL21중진행유도、표체화친화층석순화；경Western blotting초보평개ccpA적항원성.중조원핵표체질립pET-28a-ccpA경쌍매절급측서증명구건정학；표체적중조단백상대분자질량약38000,능피상관항체소식별.인차,능성공재대장간균중표체저련구균2형ccpA,위저련구균2형상관조절단백적면역학연구전정기출.
