烟草科技
煙草科技
연초과기
TOBACCO SCIENCE & TECHNOLOGY
2013年
3期
67-71,76
,共6页
侧芽%转化烟草%RNAi%TLR基因
側芽%轉化煙草%RNAi%TLR基因
측아%전화연초%RNAi%TLR기인
为了培育打顶后不长侧芽的烟草植株,通过同源克隆,在烟草(品种K326)中得到了与侧芽生长相关基因的1个片断,将该片段序列通过BLAST检索Genbank同源比对,发现该基因同番茄的LS基因有非常高的同源序列,另外与水稻的MOC基因、拟南芥的LAS基因也有一定的同源性,命名为TLR基因.将TLR基因阅读框内640 bp的正向和反向片断构建到RNAi载体pHANNIBAL内含子两侧,再经NotI酶切回收约4300 bp目的片段,并插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含TLR基因片段正反向重复序列的植物表达载体pHANNIB AL-TLR-P ART27.将pHANNIB AL-TLR-P ART27质粒导入根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,没有得到转基因再生植株,推测这与TLR基因表达被抑制有关.
為瞭培育打頂後不長側芽的煙草植株,通過同源剋隆,在煙草(品種K326)中得到瞭與側芽生長相關基因的1箇片斷,將該片段序列通過BLAST檢索Genbank同源比對,髮現該基因同番茄的LS基因有非常高的同源序列,另外與水稻的MOC基因、擬南芥的LAS基因也有一定的同源性,命名為TLR基因.將TLR基因閱讀框內640 bp的正嚮和反嚮片斷構建到RNAi載體pHANNIBAL內含子兩側,再經NotI酶切迴收約4300 bp目的片段,併插入到雙元載體質粒pART27中,成功構建瞭含TLR基因片段正反嚮重複序列的植物錶達載體pHANNIB AL-TLR-P ART27.將pHANNIB AL-TLR-P ART27質粒導入根癌農桿菌LBA4404中併轉化煙草葉片細胞,沒有得到轉基因再生植株,推測這與TLR基因錶達被抑製有關.
위료배육타정후불장측아적연초식주,통과동원극륭,재연초(품충K326)중득도료여측아생장상관기인적1개편단,장해편단서렬통과BLAST검색Genbank동원비대,발현해기인동번가적LS기인유비상고적동원서렬,령외여수도적MOC기인、의남개적LAS기인야유일정적동원성,명명위TLR기인.장TLR기인열독광내640 bp적정향화반향편단구건도RNAi재체pHANNIBAL내함자량측,재경NotI매절회수약4300 bp목적편단,병삽입도쌍원재체질립pART27중,성공구건료함TLR기인편단정반향중복서렬적식물표체재체pHANNIB AL-TLR-P ART27.장pHANNIB AL-TLR-P ART27질립도입근암농간균LBA4404중병전화연초협편세포,몰유득도전기인재생식주,추측저여TLR기인표체피억제유관.
