CAJ | 학술논문

本试验旨在探讨槲皮素对爱拔益加(AA)肉鸡脂肪细胞内分泌因子水平的影响.取10日龄AA肉仔鸡腹部脂肪,采用机械破碎和酶消化相结合的方法分离脂肪细胞,并采用油红O染色和细胞中甘油三酯(TG)含量检测的方法鉴定所分离的细胞.将脂肪细胞随机分5组(每组6个重复),空白组为基础培养液,溶剂对照组在基础培养液中添加2％二甲基亚砜,试验组分别添加10、20、40 mg/L槲皮素,于24、48、72 h收集细胞及培养液,利用酶法测定TG含量,放射性免疫法测定肿瘤坏死因子α(TNFα)含量,酶联免疫吸附测定法测定脂联素(ADP)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白含量,实时定量PCR法测定PPARγ基因mRNA表达.结果表明:1)对所取脂肪组织进行分离提纯后,显微镜下可见悬浮细胞存在.贴壁后细胞内存在可被油红O染成鲜红色的液滴,同时TG检测显示细胞中存在TG,由此鉴定所取细胞为脂肪细胞.2)基础培养液中添加10、20、40μg/mL槲皮素后,与空白组相比,脂肪细胞TG含量显著降低(P＜0.05)；脂肪细胞中TNFα和ADP含量显著增加(P＜0.05),且存在一定的剂量和时间依赖性；脂肪细胞PPARγ基因mRNA表达和蛋白含量受到抑制(P＜0.05),其中对mRNA表达的影响存在时间和剂量依赖性,而蛋白含量的变化规律不明显.综上所述,槲皮素可通过调节脂肪细胞内分泌因子TNFα、ADP和PPARγ的生成水平来降低脂肪细胞TG含量.
본시험지재탐토곡피소대애발익가(AA)육계지방세포내분비인자수평적영향.취10일령AA육자계복부지방,채용궤계파쇄화매소화상결합적방법분리지방세포,병채용유홍O염색화세포중감유삼지(TG)함량검측적방법감정소분리적세포.장지방세포수궤분5조(매조6개중복),공백조위기출배양액,용제대조조재기출배양액중첨가2％이갑기아풍,시험조분별첨가10、20、40 mg/L곡피소,우24、48、72 h수집세포급배양액,이용매법측정TG함량,방사성면역법측정종류배사인자α(TNFα)함량,매련면역흡부측정법측정지련소(ADP)화과양화물매체증식물격활수체γ(PPARγ)단백함량,실시정량PCR법측정PPARγ기인mRNA표체.결과표명:1)대소취지방조직진행분리제순후,현미경하가견현부세포존재.첩벽후세포내존재가피유홍O염성선홍색적액적,동시TG검측현시세포중존재TG,유차감정소취세포위지방세포.2)기출배양액중첨가10、20、40μg/mL곡피소후,여공백조상비,지방세포TG함량현저강저(P＜0.05)；지방세포중TNFα화ADP함량현저증가(P＜0.05),차존재일정적제량화시간의뢰성；지방세포PPARγ기인mRNA표체화단백함량수도억제(P＜0.05),기중대mRNA표체적영향존재시간화제량의뢰성,이단백함량적변화규률불명현.종상소술,곡피소가통과조절지방세포내분비인자TNFα、ADP화PPARγ적생성수평래강저지방세포TG함량.