动物营养学报
動物營養學報
동물영양학보
ACTA ZOONUTRIMENTA SINICA
2013年
3期
550-560
,共11页
田青%季昀%庞学燕%王洪荣
田青%季昀%龐學燕%王洪榮
전청%계윤%방학연%왕홍영
奶牛%乳腺上皮细胞%胰岛素%实时荧光定量PCR%mRNA
奶牛%乳腺上皮細胞%胰島素%實時熒光定量PCR%mRNA
내우%유선상피세포%이도소%실시형광정량PCR%mRNA
本文旨在通过在培养液中添加不同浓度胰岛素(INS),研究其对奶牛乳腺上皮细胞中αs1-酪蛋白(CSNl Sl)基因、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路及Janus激酶-信号传导和转录活化因子(JAK-STAT)信号通路相关基因表达的影响.试验选用中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞进行体外培养,在无血清无激素的培养基中分别添加0(对照)、2.5、25.0、250.0、5 000.0 ng/mL INS,利用实时荧光定量PCR方法检测CSNlSl基因、mTOR和JAK-STAT信号通路中相关基因表达量.结果表明:与0 ng/mL组相比,添加不同浓度的INS后均能提高CSNlSl、短型催乳素受体(S-PRLR)及mTOR信号通路中上游蛋白激酶B(PKB)、mTOR和下游真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)基因表达量,并且能够增加JAK-STAT信号通路中Janus激酶2(JAK2)和信号转导和转录激活因子5A(STAT5A)基因表达量,当INS浓度为25.0 ng/mL时各正向调节基因表达量最高.此结果提示,添加外源INS能提高奶牛乳腺上皮细胞CSNlSl基因表达量,其作用机理:一是添加INS后能够促进激素受体基因的表达,进而促进转录的启动;二是促进乳蛋白合成的mTOR和JAK-STAT信号通路中各正向调节基因的表达,进而使CSNlSl等乳蛋白合成基因能高水平表达,为进一步通过翻译水平增加乳蛋白的合成奠定了物质基础.
本文旨在通過在培養液中添加不同濃度胰島素(INS),研究其對奶牛乳腺上皮細胞中αs1-酪蛋白(CSNl Sl)基因、雷帕黴素靶蛋白(mTOR)信號通路及Janus激酶-信號傳導和轉錄活化因子(JAK-STAT)信號通路相關基因錶達的影響.試驗選用中國荷斯坦奶牛的乳腺上皮細胞進行體外培養,在無血清無激素的培養基中分彆添加0(對照)、2.5、25.0、250.0、5 000.0 ng/mL INS,利用實時熒光定量PCR方法檢測CSNlSl基因、mTOR和JAK-STAT信號通路中相關基因錶達量.結果錶明:與0 ng/mL組相比,添加不同濃度的INS後均能提高CSNlSl、短型催乳素受體(S-PRLR)及mTOR信號通路中上遊蛋白激酶B(PKB)、mTOR和下遊真覈翻譯起始因子4E結閤蛋白1(4E-BP1)基因錶達量,併且能夠增加JAK-STAT信號通路中Janus激酶2(JAK2)和信號轉導和轉錄激活因子5A(STAT5A)基因錶達量,噹INS濃度為25.0 ng/mL時各正嚮調節基因錶達量最高.此結果提示,添加外源INS能提高奶牛乳腺上皮細胞CSNlSl基因錶達量,其作用機理:一是添加INS後能夠促進激素受體基因的錶達,進而促進轉錄的啟動;二是促進乳蛋白閤成的mTOR和JAK-STAT信號通路中各正嚮調節基因的錶達,進而使CSNlSl等乳蛋白閤成基因能高水平錶達,為進一步通過翻譯水平增加乳蛋白的閤成奠定瞭物質基礎.
본문지재통과재배양액중첨가불동농도이도소(INS),연구기대내우유선상피세포중αs1-락단백(CSNl Sl)기인、뢰파매소파단백(mTOR)신호통로급Janus격매-신호전도화전록활화인자(JAK-STAT)신호통로상관기인표체적영향.시험선용중국하사탄내우적유선상피세포진행체외배양,재무혈청무격소적배양기중분별첨가0(대조)、2.5、25.0、250.0、5 000.0 ng/mL INS,이용실시형광정량PCR방법검측CSNlSl기인、mTOR화JAK-STAT신호통로중상관기인표체량.결과표명:여0 ng/mL조상비,첨가불동농도적INS후균능제고CSNlSl、단형최유소수체(S-PRLR)급mTOR신호통로중상유단백격매B(PKB)、mTOR화하유진핵번역기시인자4E결합단백1(4E-BP1)기인표체량,병차능구증가JAK-STAT신호통로중Janus격매2(JAK2)화신호전도화전록격활인자5A(STAT5A)기인표체량,당INS농도위25.0 ng/mL시각정향조절기인표체량최고.차결과제시,첨가외원INS능제고내우유선상피세포CSNlSl기인표체량,기작용궤리:일시첨가INS후능구촉진격소수체기인적표체,진이촉진전록적계동;이시촉진유단백합성적mTOR화JAK-STAT신호통로중각정향조절기인적표체,진이사CSNlSl등유단백합성기인능고수평표체,위진일보통과번역수평증가유단백적합성전정료물질기출.