中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2013年
5期
203-207
,共5页
李秀丽%贺嵩敏%朱莹%冯兵%黄小千%陈婷%郑广娟
李秀麗%賀嵩敏%硃瑩%馮兵%黃小韆%陳婷%鄭廣娟
리수려%하숭민%주형%풍병%황소천%진정%정엄연
HepG2细胞%胰岛素抵抗模型%胰岛素受体底物-2%葡萄糖-6-磷酸酶
HepG2細胞%胰島素牴抗模型%胰島素受體底物-2%葡萄糖-6-燐痠酶
HepG2세포%이도소저항모형%이도소수체저물-2%포도당-6-린산매
目的:采用胰岛素体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,为研究胰岛素抵抗及2型糖尿病提供一种可靠的体外胰岛素抵抗模型.方法:采用含不同胰岛素浓度的RPMI 1640培养基作用于HepG2细胞,葡萄糖-己糖激酶法检测作用不同时间点培养基中葡萄糖含量,MTT法检测各胰岛素浓度对HepG2细胞存活率的影响,确定胰岛素抵抗最佳作用浓度及时间；并以油红0染色观察细胞形态的变化；Real-time PCR法检测IRS-2 mRNA的表达,酶联免疫法检测葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的表达.结果:细胞产生胰岛素抵抗的最佳作用时间为36 h,最佳胰岛素浓度为1 × 10-8 mol·L-1.建立模型后鉴定,模型细胞与正常细胞相比脂滴明显增多；IRS-2 mRNA的表达较正常细胞明显降低(P＜0.05),G-6-Pase的表达较正常细胞明显升高(P＜0.05).结论:采用胰岛素体外诱导的方法,在胰岛素浓度为1×10-8mol·L-1,作用36 h后,可建立稳定的HepG2细胞胰岛素抵抗模型.
目的:採用胰島素體外誘導法建立HepG2細胞胰島素牴抗模型,為研究胰島素牴抗及2型糖尿病提供一種可靠的體外胰島素牴抗模型.方法:採用含不同胰島素濃度的RPMI 1640培養基作用于HepG2細胞,葡萄糖-己糖激酶法檢測作用不同時間點培養基中葡萄糖含量,MTT法檢測各胰島素濃度對HepG2細胞存活率的影響,確定胰島素牴抗最佳作用濃度及時間；併以油紅0染色觀察細胞形態的變化；Real-time PCR法檢測IRS-2 mRNA的錶達,酶聯免疫法檢測葡萄糖-6-燐痠酶(G-6-Pase)的錶達.結果:細胞產生胰島素牴抗的最佳作用時間為36 h,最佳胰島素濃度為1 × 10-8 mol·L-1.建立模型後鑒定,模型細胞與正常細胞相比脂滴明顯增多；IRS-2 mRNA的錶達較正常細胞明顯降低(P＜0.05),G-6-Pase的錶達較正常細胞明顯升高(P＜0.05).結論:採用胰島素體外誘導的方法,在胰島素濃度為1×10-8mol·L-1,作用36 h後,可建立穩定的HepG2細胞胰島素牴抗模型.
목적:채용이도소체외유도법건립HepG2세포이도소저항모형,위연구이도소저항급2형당뇨병제공일충가고적체외이도소저항모형.방법:채용함불동이도소농도적RPMI 1640배양기작용우HepG2세포,포도당-기당격매법검측작용불동시간점배양기중포도당함량,MTT법검측각이도소농도대HepG2세포존활솔적영향,학정이도소저항최가작용농도급시간；병이유홍0염색관찰세포형태적변화；Real-time PCR법검측IRS-2 mRNA적표체,매련면역법검측포도당-6-린산매(G-6-Pase)적표체.결과:세포산생이도소저항적최가작용시간위36 h,최가이도소농도위1 × 10-8 mol·L-1.건립모형후감정,모형세포여정상세포상비지적명현증다；IRS-2 mRNA적표체교정상세포명현강저(P＜0.05),G-6-Pase적표체교정상세포명현승고(P＜0.05).결론:채용이도소체외유도적방법,재이도소농도위1×10-8mol·L-1,작용36 h후,가건립은정적HepG2세포이도소저항모형.
