安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
6期
2471-2473
,共3页
周焱伟%贺丛%许利凡%王绿林%吴胜强%邓立新%王世根
週焱偉%賀叢%許利凡%王綠林%吳勝彊%鄧立新%王世根
주염위%하총%허리범%왕록림%오성강%산립신%왕세근
琥珀酸丝状杆菌%RT-PCR%标准曲线
琥珀痠絲狀桿菌%RT-PCR%標準麯線
호박산사상간균%RT-PCR%표준곡선
[目的]了解牛瘤胃内微生物的变化.[方法]以琥珀酸丝状杆菌为对象,根据16S rRNA序列分别设计引物.从牛瘤胃液提取总DNA,扩增琥珀酸丝状杆菌的DNA片段,并连接在pDM-18T载体上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模版进行RT-PCR.[结果]扩增的目的片段与已知的菌种相应片段的同源性为100％.以不同稀释度的重组pMD-18T为模板建立的RT-PCR扩增曲线有明显差异,绘制标准曲线的相关系数接近1,熔解曲线呈单一峰值.[结论]成功建立了琥珀酸丝状杆菌的实时荧光定量PCR方法,为进一步研究瘤胃内微生物变化奠定基础.
[目的]瞭解牛瘤胃內微生物的變化.[方法]以琥珀痠絲狀桿菌為對象,根據16S rRNA序列分彆設計引物.從牛瘤胃液提取總DNA,擴增琥珀痠絲狀桿菌的DNA片段,併連接在pDM-18T載體上,經PCR和測序鑒定後,以不同稀釋度的重組質粒為模版進行RT-PCR.[結果]擴增的目的片段與已知的菌種相應片段的同源性為100％.以不同稀釋度的重組pMD-18T為模闆建立的RT-PCR擴增麯線有明顯差異,繪製標準麯線的相關繫數接近1,鎔解麯線呈單一峰值.[結論]成功建立瞭琥珀痠絲狀桿菌的實時熒光定量PCR方法,為進一步研究瘤胃內微生物變化奠定基礎.
[목적]료해우류위내미생물적변화.[방법]이호박산사상간균위대상,근거16S rRNA서렬분별설계인물.종우류위액제취총DNA,확증호박산사상간균적DNA편단,병련접재pDM-18T재체상,경PCR화측서감정후,이불동희석도적중조질립위모판진행RT-PCR.[결과]확증적목적편단여이지적균충상응편단적동원성위100％.이불동희석도적중조pMD-18T위모판건립적RT-PCR확증곡선유명현차이,회제표준곡선적상관계수접근1,용해곡선정단일봉치.[결론]성공건립료호박산사상간균적실시형광정량PCR방법,위진일보연구류위내미생물변화전정기출.
