山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
47期
8-10
,共3页
江青山%肖桃源%邓文蓉%沈宝茗
江青山%肖桃源%鄧文蓉%瀋寶茗
강청산%초도원%산문용%침보명
pcDNA3.1(+)-血清淀粉样蛋白A%CNE-2细胞%转染%增殖
pcDNA3.1(+)-血清澱粉樣蛋白A%CNE-2細胞%轉染%增殖
pcDNA3.1(+)-혈청정분양단백A%CNE-2세포%전염%증식
pcDNA3.1 (+)-serum amyloid A%CNE-2 cells%transfection%proliferation
目的 构建pcDNA3.1(+)-血清淀粉样蛋白A(SAA)真核表达载体,观察其在人鼻咽癌细胞CNE-2中的表达及对CNE-2增殖的影响.方法 以CNE-2细胞的cDNA为模板,通过PCR扩增得到SAA片段,经酶切、纯化后与pcDNA3.1(+)连接;重组质粒经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染法转染人鼻咽癌细胞CNE-2,用Western blot法检测转染前后该细胞中SAA蛋白的表达,并用MTT法检测转染重组质粒后的细胞增殖情况.结果 pcDNA3.1(+)-SAA经酶切、测序鉴定完全正确,真核表达载体构建成功;转染pcDNA3.1(+)-SAA真核表达载体后CNE-2细胞中SAA蛋白表达水平明显高增高;转染pcDNA3.1(+)-SAA后CNE-2细胞增殖速度加快.结论 成功构建pcDNA3.1(+)-SAA真核表达载体,其能稳定表达于人鼻咽癌细胞CNE-2并促进细胞增殖;此为进一步研究SAA的生物学功能及鼻咽癌的新型治疗方法奠定了基础.
目的 構建pcDNA3.1(+)-血清澱粉樣蛋白A(SAA)真覈錶達載體,觀察其在人鼻嚥癌細胞CNE-2中的錶達及對CNE-2增殖的影響.方法 以CNE-2細胞的cDNA為模闆,通過PCR擴增得到SAA片段,經酶切、純化後與pcDNA3.1(+)連接;重組質粒經酶切分析及測序鑒定後,用脂質體轉染法轉染人鼻嚥癌細胞CNE-2,用Western blot法檢測轉染前後該細胞中SAA蛋白的錶達,併用MTT法檢測轉染重組質粒後的細胞增殖情況.結果 pcDNA3.1(+)-SAA經酶切、測序鑒定完全正確,真覈錶達載體構建成功;轉染pcDNA3.1(+)-SAA真覈錶達載體後CNE-2細胞中SAA蛋白錶達水平明顯高增高;轉染pcDNA3.1(+)-SAA後CNE-2細胞增殖速度加快.結論 成功構建pcDNA3.1(+)-SAA真覈錶達載體,其能穩定錶達于人鼻嚥癌細胞CNE-2併促進細胞增殖;此為進一步研究SAA的生物學功能及鼻嚥癌的新型治療方法奠定瞭基礎.
목적 구건pcDNA3.1(+)-혈청정분양단백A(SAA)진핵표체재체,관찰기재인비인암세포CNE-2중적표체급대CNE-2증식적영향.방법 이CNE-2세포적cDNA위모판,통과PCR확증득도SAA편단,경매절、순화후여pcDNA3.1(+)련접;중조질립경매절분석급측서감정후,용지질체전염법전염인비인암세포CNE-2,용Western blot법검측전염전후해세포중SAA단백적표체,병용MTT법검측전염중조질립후적세포증식정황.결과 pcDNA3.1(+)-SAA경매절、측서감정완전정학,진핵표체재체구건성공;전염pcDNA3.1(+)-SAA진핵표체재체후CNE-2세포중SAA단백표체수평명현고증고;전염pcDNA3.1(+)-SAA후CNE-2세포증식속도가쾌.결론 성공구건pcDNA3.1(+)-SAA진핵표체재체,기능은정표체우인비인암세포CNE-2병촉진세포증식;차위진일보연구SAA적생물학공능급비인암적신형치료방법전정료기출.
