中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
5期
664-669
,共6页
王健峰%杨俊卿%黄砚%谢灵瑶%郭远新%雷文娟
王健峰%楊俊卿%黃硯%謝靈瑤%郭遠新%雷文娟
왕건봉%양준경%황연%사령요%곽원신%뢰문연
5-LO表达%铝%原代培养%海马神经元%腺病毒%神经元损伤%氧化应激
5-LO錶達%鋁%原代培養%海馬神經元%腺病毒%神經元損傷%氧化應激
5-LO표체%려%원대배양%해마신경원%선병독%신경원손상%양화응격
目的 观察5-LO表达对铝盐致原代培养海马神经元损伤的影响.方法 将5-LO过表达重组体腺病毒(Ad5-LO)和5-LO RNAi重组体腺病毒(Ad5-LO-RNAi)转染原代培养7 d的海马神经元,实验随机分为7组:空白对照组(NaCl 200 μmol·L-1)、空载腺病毒组(MOI=100)、5-LO过表达腺病毒组(MOI=100)、5-LO RNAi腺病毒组(MOI=100)、空载腺病毒(MOI=100)+铝盐负荷组(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO过表达腺病毒(MOI=100)+铝盐负荷组(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO RNAi腺病毒(MOI=100)+铝盐负荷组(AlCl3 200 μmol·L-1).采用荧光显微镜观察海马神经元形态变化,以RT-PCR和Western blot方法分别检测神经元5-LO mRNA和蛋白表达,以MTT测定和LDH漏出率检测神经元存活情况,以生化方法测定海马神经元SOD活性和MDA含量变化.结果 空载腺病毒+铝盐负荷组神经元数目明显减少,胞体萎缩,突起减少变短,5-LO mRNA和蛋白表达增多,MTT值降低,LDH漏出率增多,SOD活性降低,MDA含量增加.与空载腺病毒+铝盐负荷组比较,5-LO过表达腺病毒处理使铝盐负荷神经元上述指标的变化更加明显;5-LO RNAi腺病毒处理能明显阻遏铝盐负荷组海马神经元上述指标的变化.结论 5-LO过表达可增加大鼠海马神经元对铝盐损伤的易感性,而抑制5-LO表达能够减轻铝盐对大鼠海马神经元的损伤.
目的 觀察5-LO錶達對鋁鹽緻原代培養海馬神經元損傷的影響.方法 將5-LO過錶達重組體腺病毒(Ad5-LO)和5-LO RNAi重組體腺病毒(Ad5-LO-RNAi)轉染原代培養7 d的海馬神經元,實驗隨機分為7組:空白對照組(NaCl 200 μmol·L-1)、空載腺病毒組(MOI=100)、5-LO過錶達腺病毒組(MOI=100)、5-LO RNAi腺病毒組(MOI=100)、空載腺病毒(MOI=100)+鋁鹽負荷組(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO過錶達腺病毒(MOI=100)+鋁鹽負荷組(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO RNAi腺病毒(MOI=100)+鋁鹽負荷組(AlCl3 200 μmol·L-1).採用熒光顯微鏡觀察海馬神經元形態變化,以RT-PCR和Western blot方法分彆檢測神經元5-LO mRNA和蛋白錶達,以MTT測定和LDH漏齣率檢測神經元存活情況,以生化方法測定海馬神經元SOD活性和MDA含量變化.結果 空載腺病毒+鋁鹽負荷組神經元數目明顯減少,胞體萎縮,突起減少變短,5-LO mRNA和蛋白錶達增多,MTT值降低,LDH漏齣率增多,SOD活性降低,MDA含量增加.與空載腺病毒+鋁鹽負荷組比較,5-LO過錶達腺病毒處理使鋁鹽負荷神經元上述指標的變化更加明顯;5-LO RNAi腺病毒處理能明顯阻遏鋁鹽負荷組海馬神經元上述指標的變化.結論 5-LO過錶達可增加大鼠海馬神經元對鋁鹽損傷的易感性,而抑製5-LO錶達能夠減輕鋁鹽對大鼠海馬神經元的損傷.
목적 관찰5-LO표체대려염치원대배양해마신경원손상적영향.방법 장5-LO과표체중조체선병독(Ad5-LO)화5-LO RNAi중조체선병독(Ad5-LO-RNAi)전염원대배양7 d적해마신경원,실험수궤분위7조:공백대조조(NaCl 200 μmol·L-1)、공재선병독조(MOI=100)、5-LO과표체선병독조(MOI=100)、5-LO RNAi선병독조(MOI=100)、공재선병독(MOI=100)+려염부하조(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO과표체선병독(MOI=100)+려염부하조(AlCl3 200 μmol·L-1)、5-LO RNAi선병독(MOI=100)+려염부하조(AlCl3 200 μmol·L-1).채용형광현미경관찰해마신경원형태변화,이RT-PCR화Western blot방법분별검측신경원5-LO mRNA화단백표체,이MTT측정화LDH루출솔검측신경원존활정황,이생화방법측정해마신경원SOD활성화MDA함량변화.결과 공재선병독+려염부하조신경원수목명현감소,포체위축,돌기감소변단,5-LO mRNA화단백표체증다,MTT치강저,LDH루출솔증다,SOD활성강저,MDA함량증가.여공재선병독+려염부하조비교,5-LO과표체선병독처리사려염부하신경원상술지표적변화경가명현;5-LO RNAi선병독처리능명현조알려염부하조해마신경원상술지표적변화.결론 5-LO과표체가증가대서해마신경원대려염손상적역감성,이억제5-LO표체능구감경려염대대서해마신경원적손상.