安徽中医学院学报
安徽中醫學院學報
안휘중의학원학보
2013年
6期
74-77
,共4页
林锐珊%赵平%吴绍锋%罗海燕%伍趣京%苏宁
林銳珊%趙平%吳紹鋒%囉海燕%伍趣京%囌寧
림예산%조평%오소봉%라해연%오취경%소저
肾小球系膜细胞%黄芩苷%缝隙连接%蛋白激酶C%缝隙连接蛋白43
腎小毬繫膜細胞%黃芩苷%縫隙連接%蛋白激酶C%縫隙連接蛋白43
신소구계막세포%황금감%봉극련접%단백격매C%봉극련접단백43
目的 研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)中缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的影响.方法 将体外培养的大鼠GMC分为6组:低糖组,高糖组,黄芩苷低、中、高剂量组,蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂组.培养72 h后,收集细胞并提取细胞总蛋白,Western-blot法检测黄芩苷对高糖环境下GMC中PKC和Cx43表达的影响,用划痕标记染料示踪技术检测黄芩苷对GMC缝隙链接通讯功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的影响.结果 Western-blot结果显示,与低糖组比较,高糖组中PKC蛋白表达量显著增加(P<0.01),Cx43蛋白表达量显著减少(P<0.01);黄芩苷呈剂量依赖性降低PKC蛋白表达水平,升高Cx43蛋白表达水平.划痕标记染料示踪实验结果显示:与低糖组比较,高糖组GMC的GJIC功能缺乏,未向邻近细胞传输;与高糖组比较,PKC抑制剂组罗氏黄荧光染料向划痕两侧邻近细胞传输的层数较黄芩苷各剂量组明显增多,黄芩苷各剂量组呈剂量依赖性地增加传递的层数.结论 黄芩苷可剂量依赖性地抑制高糖环境下GMC中PKC的异常活化,从而上调Cx43表达,恢复GJIC的功能.
目的 研究黃芩苷對高糖環境下腎小毬繫膜細胞(glomerular mesangial cell,GMC)中縫隙連接蛋白43(connexin 43,Cx43)錶達的影響.方法 將體外培養的大鼠GMC分為6組:低糖組,高糖組,黃芩苷低、中、高劑量組,蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑製劑組.培養72 h後,收集細胞併提取細胞總蛋白,Western-blot法檢測黃芩苷對高糖環境下GMC中PKC和Cx43錶達的影響,用劃痕標記染料示蹤技術檢測黃芩苷對GMC縫隙鏈接通訊功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的影響.結果 Western-blot結果顯示,與低糖組比較,高糖組中PKC蛋白錶達量顯著增加(P<0.01),Cx43蛋白錶達量顯著減少(P<0.01);黃芩苷呈劑量依賴性降低PKC蛋白錶達水平,升高Cx43蛋白錶達水平.劃痕標記染料示蹤實驗結果顯示:與低糖組比較,高糖組GMC的GJIC功能缺乏,未嚮鄰近細胞傳輸;與高糖組比較,PKC抑製劑組囉氏黃熒光染料嚮劃痕兩側鄰近細胞傳輸的層數較黃芩苷各劑量組明顯增多,黃芩苷各劑量組呈劑量依賴性地增加傳遞的層數.結論 黃芩苷可劑量依賴性地抑製高糖環境下GMC中PKC的異常活化,從而上調Cx43錶達,恢複GJIC的功能.
목적 연구황금감대고당배경하신소구계막세포(glomerular mesangial cell,GMC)중봉극련접단백43(connexin 43,Cx43)표체적영향.방법 장체외배양적대서GMC분위6조:저당조,고당조,황금감저、중、고제량조,단백격매C(protein kinase C,PKC)억제제조.배양72 h후,수집세포병제취세포총단백,Western-blot법검측황금감대고당배경하GMC중PKC화Cx43표체적영향,용화흔표기염료시종기술검측황금감대GMC봉극련접통신공능(gap junction intercellular communication,GJIC)적영향.결과 Western-blot결과현시,여저당조비교,고당조중PKC단백표체량현저증가(P<0.01),Cx43단백표체량현저감소(P<0.01);황금감정제량의뢰성강저PKC단백표체수평,승고Cx43단백표체수평.화흔표기염료시종실험결과현시:여저당조비교,고당조GMC적GJIC공능결핍,미향린근세포전수;여고당조비교,PKC억제제조라씨황형광염료향화흔량측린근세포전수적층수교황금감각제량조명현증다,황금감각제량조정제량의뢰성지증가전체적층수.결론 황금감가제량의뢰성지억제고당배경하GMC중PKC적이상활화,종이상조Cx43표체,회복GJIC적공능.