中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
12期
1240-1243,1253
,共5页
石春燕%何琼%杨晶晶%庄国洪
石春燕%何瓊%楊晶晶%莊國洪
석춘연%하경%양정정%장국홍
类风湿关节炎%佐剂型关节炎%成纤维样滑膜细胞%DR5%TIPE2
類風濕關節炎%佐劑型關節炎%成纖維樣滑膜細胞%DR5%TIPE2
류풍습관절염%좌제형관절염%성섬유양활막세포%DR5%TIPE2
目的:通过TIPE2表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎 (AA) 成纤维样滑膜细胞 (FLS),体外研究 AA 的发病中 TIPE2 对DR5介导细胞凋亡的作用.方法:应用 MIGR1/TIPE2+/+ 表达质粒,经脂质体法导入AA-FLS细胞中,转染72小时后,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,以未作处理的AA-FLS为对照组,用半定量逆转录聚合酶链反应 ( RT-PCR ) 检测 TIPE2 mRNA的表达,用 Western blot 法检测TIPE2 蛋白的表达变化,MTT 法以及流式细胞术检测抗 DR5 功能性单链抗体ZF1对两组细胞生长的影响.结果:成功获得荧光强度90% 的 TIPE2过表达 AA-FLS 细胞,TIPE2 mRNA 及蛋白表达显著提高.抗 DR5 单链抗体 ZF1 对 TIPE2+/+ 的FLS组细胞具有明显生长抑制及凋亡诱导作用,与不作处理的FLS组相比差异显著.结论:TIPE2+/+表达质粒明显提升AA-FLS的TIPE2蛋白表达水平,TIPE2 对 DR5 介导细胞凋亡有重要作用.
目的:通過TIPE2錶達質粒轉染大鼠佐劑型關節炎 (AA) 成纖維樣滑膜細胞 (FLS),體外研究 AA 的髮病中 TIPE2 對DR5介導細胞凋亡的作用.方法:應用 MIGR1/TIPE2+/+ 錶達質粒,經脂質體法導入AA-FLS細胞中,轉染72小時後,熒光顯微鏡檢測質粒自帶GFP基因的錶達情況確認轉染效率,以未作處理的AA-FLS為對照組,用半定量逆轉錄聚閤酶鏈反應 ( RT-PCR ) 檢測 TIPE2 mRNA的錶達,用 Western blot 法檢測TIPE2 蛋白的錶達變化,MTT 法以及流式細胞術檢測抗 DR5 功能性單鏈抗體ZF1對兩組細胞生長的影響.結果:成功穫得熒光彊度90% 的 TIPE2過錶達 AA-FLS 細胞,TIPE2 mRNA 及蛋白錶達顯著提高.抗 DR5 單鏈抗體 ZF1 對 TIPE2+/+ 的FLS組細胞具有明顯生長抑製及凋亡誘導作用,與不作處理的FLS組相比差異顯著.結論:TIPE2+/+錶達質粒明顯提升AA-FLS的TIPE2蛋白錶達水平,TIPE2 對 DR5 介導細胞凋亡有重要作用.
목적:통과TIPE2표체질립전염대서좌제형관절염 (AA) 성섬유양활막세포 (FLS),체외연구 AA 적발병중 TIPE2 대DR5개도세포조망적작용.방법:응용 MIGR1/TIPE2+/+ 표체질립,경지질체법도입AA-FLS세포중,전염72소시후,형광현미경검측질립자대GFP기인적표체정황학인전염효솔,이미작처리적AA-FLS위대조조,용반정량역전록취합매련반응 ( RT-PCR ) 검측 TIPE2 mRNA적표체,용 Western blot 법검측TIPE2 단백적표체변화,MTT 법이급류식세포술검측항 DR5 공능성단련항체ZF1대량조세포생장적영향.결과:성공획득형광강도90% 적 TIPE2과표체 AA-FLS 세포,TIPE2 mRNA 급단백표체현저제고.항 DR5 단련항체 ZF1 대 TIPE2+/+ 적FLS조세포구유명현생장억제급조망유도작용,여불작처리적FLS조상비차이현저.결론:TIPE2+/+표체질립명현제승AA-FLS적TIPE2단백표체수평,TIPE2 대 DR5 개도세포조망유중요작용.
