中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
2期
485-490
,共6页
陈津%马予洁%王姿%林珊珊%肖凤君%王华%王立生%郭子宽
陳津%馬予潔%王姿%林珊珊%肖鳳君%王華%王立生%郭子寬
진진%마여길%왕자%림산산%초봉군%왕화%왕립생%곽자관
间充质干细胞%凝血酶%细胞增殖%蛋白酶活化受体
間充質榦細胞%凝血酶%細胞增殖%蛋白酶活化受體
간충질간세포%응혈매%세포증식%단백매활화수체
mesenchymal stem cell%thrombin,cell proliferation%protease activated receptor
本研究旨在探讨凝血酶促进人间充质干细胞(MSC)增殖及其机制.在无血清基础培养液中添加不同浓度凝血酶,用MTT实验检测人骨髓MSC增殖状态,PCR检测细胞蛋白酶活化受体(PAR)和c-MYC表达,Western blot分析信号通路的变化,并通过特异性抑制剂阻断凝血酶受体和信号通路,验证凝血酶作用的机制.结果显示,凝血酶可显著刺激MSC增殖,效应呈浓度依赖性;当凝血酶浓度为0.5 U/ml时,细胞增殖明显提高,浓度为8 U/ml时,刺激活性达峰值(P＜0.01);PCR结果表明,MSC表达PAR-1和PAR2;当PAR1受体被阻断后凝血酶的促增殖效应被抑制,而PAR2受体被阻断后凝血酶对增殖结果影响不明显;凝血酶刺激MSC后,信号分子AKT发生磷酸化,c-MYC基因表达上调;当AKT信号通路被抑制后,c-MYC表达被抑制,凝血酶刺激细胞增殖效应被明显抑制.结论:凝血酶可通过PAR1受体介导的AKT信号通路的活化,上调MYC基因的表达,从而促进间充质干细胞的增殖.
本研究旨在探討凝血酶促進人間充質榦細胞(MSC)增殖及其機製.在無血清基礎培養液中添加不同濃度凝血酶,用MTT實驗檢測人骨髓MSC增殖狀態,PCR檢測細胞蛋白酶活化受體(PAR)和c-MYC錶達,Western blot分析信號通路的變化,併通過特異性抑製劑阻斷凝血酶受體和信號通路,驗證凝血酶作用的機製.結果顯示,凝血酶可顯著刺激MSC增殖,效應呈濃度依賴性;噹凝血酶濃度為0.5 U/ml時,細胞增殖明顯提高,濃度為8 U/ml時,刺激活性達峰值(P＜0.01);PCR結果錶明,MSC錶達PAR-1和PAR2;噹PAR1受體被阻斷後凝血酶的促增殖效應被抑製,而PAR2受體被阻斷後凝血酶對增殖結果影響不明顯;凝血酶刺激MSC後,信號分子AKT髮生燐痠化,c-MYC基因錶達上調;噹AKT信號通路被抑製後,c-MYC錶達被抑製,凝血酶刺激細胞增殖效應被明顯抑製.結論:凝血酶可通過PAR1受體介導的AKT信號通路的活化,上調MYC基因的錶達,從而促進間充質榦細胞的增殖.
본연구지재탐토응혈매촉진인간충질간세포(MSC)증식급기궤제.재무혈청기출배양액중첨가불동농도응혈매,용MTT실험검측인골수MSC증식상태,PCR검측세포단백매활화수체(PAR)화c-MYC표체,Western blot분석신호통로적변화,병통과특이성억제제조단응혈매수체화신호통로,험증응혈매작용적궤제.결과현시,응혈매가현저자격MSC증식,효응정농도의뢰성;당응혈매농도위0.5 U/ml시,세포증식명현제고,농도위8 U/ml시,자격활성체봉치(P＜0.01);PCR결과표명,MSC표체PAR-1화PAR2;당PAR1수체피조단후응혈매적촉증식효응피억제,이PAR2수체피조단후응혈매대증식결과영향불명현;응혈매자격MSC후,신호분자AKT발생린산화,c-MYC기인표체상조;당AKT신호통로피억제후,c-MYC표체피억제,응혈매자격세포증식효응피명현억제.결론:응혈매가통과PAR1수체개도적AKT신호통로적활화,상조MYC기인적표체,종이촉진간충질간세포적증식.
