中国调味品
中國調味品
중국조미품
CHINESE CONDIMENT
2013年
1期
32-35
,共4页
明串珠菌%电转化%优化
明串珠菌%電轉化%優化
명천주균%전전화%우화
为了构建食品级基因工程受体菌,课题对明串珠菌的电转化条件进行了优化.以大肠杆菌-明串珠菌穿梭质粒pCW4为载体,以明串珠菌为受体,文章优化了细胞壁处理方式、电击参数、复苏时间等与电转化相关的因素.结果表明:用氨苄浓度0.7μg/mL的MRS培养基培养明串珠菌至OD600为0.5左右,以PBS作缓冲液,收获制成感受态细胞,与1μg DNA混合,在电场强度12 kV/cm、电阻200 Ω、电容25μF下电击转化,以含80 mmol/L MgCl2的MRS培养基复苏培养3h,得到最高的转化效率为1.75×105 cfu/μg DNA.
為瞭構建食品級基因工程受體菌,課題對明串珠菌的電轉化條件進行瞭優化.以大腸桿菌-明串珠菌穿梭質粒pCW4為載體,以明串珠菌為受體,文章優化瞭細胞壁處理方式、電擊參數、複囌時間等與電轉化相關的因素.結果錶明:用氨芐濃度0.7μg/mL的MRS培養基培養明串珠菌至OD600為0.5左右,以PBS作緩遲液,收穫製成感受態細胞,與1μg DNA混閤,在電場彊度12 kV/cm、電阻200 Ω、電容25μF下電擊轉化,以含80 mmol/L MgCl2的MRS培養基複囌培養3h,得到最高的轉化效率為1.75×105 cfu/μg DNA.
위료구건식품급기인공정수체균,과제대명천주균적전전화조건진행료우화.이대장간균-명천주균천사질립pCW4위재체,이명천주균위수체,문장우화료세포벽처리방식、전격삼수、복소시간등여전전화상관적인소.결과표명:용안변농도0.7μg/mL적MRS배양기배양명천주균지OD600위0.5좌우,이PBS작완충액,수획제성감수태세포,여1μg DNA혼합,재전장강도12 kV/cm、전조200 Ω、전용25μF하전격전화,이함80 mmol/L MgCl2적MRS배양기복소배양3h,득도최고적전화효솔위1.75×105 cfu/μg DNA.
