现代医药卫生
現代醫藥衛生
현대의약위생
MODERN MEDICINE HEALTH
2013年
23期
3535-3537
,共3页
T淋巴细胞,辅助诱导%流式细胞术%细胞,培养的%佛波醇酯类%离子霉素%细胞因子类%抗原,CD3%抗原,CD8%抗原,CD4%大鼠
T淋巴細胞,輔助誘導%流式細胞術%細胞,培養的%彿波醇酯類%離子黴素%細胞因子類%抗原,CD3%抗原,CD8%抗原,CD4%大鼠
T림파세포,보조유도%류식세포술%세포,배양적%불파순지류%리자매소%세포인자류%항원,CD3%항원,CD8%항원,CD4%대서
目的 探讨流式细胞术检测大鼠Th1/Th2细胞时使用刺激剂的最佳方案.方法用不同浓度佛波酯(PMA)联合不同浓度离子霉素(Ion)作为激活剂,刺激大鼠外周血T淋巴细胞,采用流式细胞仪三色法方案,观察和分析在不同浓度组合的激活剂刺激下检测T淋巴细胞内干扰素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)的分泌效果.结果PMA浓度为25 ng/mL时,联合浓度分别为0、2、5、10、15、20 μg/mL的Ion刺激大鼠淋巴细胞,胞内IFN-γ/IL-4的表达阳性率分别为(1.19±0.26)%/(2.46±0.32)%、(1.23±0.21)%/(2.56±0.86)%、(3.08±0.56)%/(12.01±2.01)%、(4.01±0.48)%/(9.80±1.80)%、(3.98±1.78)%/(11.85±4.83)%、(3.76±1.08)%/(10.78±2.35)%.结论选用工作浓度为5～10 μg/mL的Ion联合工作浓度为25 ng/mL的PMA刺激培养大鼠淋巴细胞即可起到较好的激活作用,而且不会带来如CD4细胞下调、流式细胞术设门难度增加等干扰因素.在该浓度下,CD3/CD8和CD4两种设门方案均可用于大鼠Th1/Th2细胞检测.
目的 探討流式細胞術檢測大鼠Th1/Th2細胞時使用刺激劑的最佳方案.方法用不同濃度彿波酯(PMA)聯閤不同濃度離子黴素(Ion)作為激活劑,刺激大鼠外週血T淋巴細胞,採用流式細胞儀三色法方案,觀察和分析在不同濃度組閤的激活劑刺激下檢測T淋巴細胞內榦擾素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)的分泌效果.結果PMA濃度為25 ng/mL時,聯閤濃度分彆為0、2、5、10、15、20 μg/mL的Ion刺激大鼠淋巴細胞,胞內IFN-γ/IL-4的錶達暘性率分彆為(1.19±0.26)%/(2.46±0.32)%、(1.23±0.21)%/(2.56±0.86)%、(3.08±0.56)%/(12.01±2.01)%、(4.01±0.48)%/(9.80±1.80)%、(3.98±1.78)%/(11.85±4.83)%、(3.76±1.08)%/(10.78±2.35)%.結論選用工作濃度為5～10 μg/mL的Ion聯閤工作濃度為25 ng/mL的PMA刺激培養大鼠淋巴細胞即可起到較好的激活作用,而且不會帶來如CD4細胞下調、流式細胞術設門難度增加等榦擾因素.在該濃度下,CD3/CD8和CD4兩種設門方案均可用于大鼠Th1/Th2細胞檢測.
목적 탐토류식세포술검측대서Th1/Th2세포시사용자격제적최가방안.방법용불동농도불파지(PMA)연합불동농도리자매소(Ion)작위격활제,자격대서외주혈T림파세포,채용류식세포의삼색법방안,관찰화분석재불동농도조합적격활제자격하검측T림파세포내간우소-γ(INF-γ)、백개소-4(IL-4)적분비효과.결과PMA농도위25 ng/mL시,연합농도분별위0、2、5、10、15、20 μg/mL적Ion자격대서림파세포,포내IFN-γ/IL-4적표체양성솔분별위(1.19±0.26)%/(2.46±0.32)%、(1.23±0.21)%/(2.56±0.86)%、(3.08±0.56)%/(12.01±2.01)%、(4.01±0.48)%/(9.80±1.80)%、(3.98±1.78)%/(11.85±4.83)%、(3.76±1.08)%/(10.78±2.35)%.결론선용공작농도위5～10 μg/mL적Ion연합공작농도위25 ng/mL적PMA자격배양대서림파세포즉가기도교호적격활작용,이차불회대래여CD4세포하조、류식세포술설문난도증가등간우인소.재해농도하,CD3/CD8화CD4량충설문방안균가용우대서Th1/Th2세포검측.
