国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2013年
18期
2355-2357
,共3页
组织激肽释放酶8%腺病毒载体%逆转录聚合酶链反应
組織激肽釋放酶8%腺病毒載體%逆轉錄聚閤酶鏈反應
조직격태석방매8%선병독재체%역전록취합매련반응
Kallikrein 8%recombinant adenoviral vector%reverse transcriptase polymerase chain reaction
目的 构建大鼠组织激肽释放酶8(KLK8)的腺病毒表达载体,为进一步研究KLK8对心肌细胞的作用提供实验基础.方法 采用AdEasy系统构建携带外源性KLK8编码基因的重组腺病毒载体pAd-KLK8,转染AD-293细胞包装产生重组腺病毒Ad-KLK8,TCID50法对收获病毒进行滴度鉴定,RT-PCR及Western-blot方法检测目的基因在Hela细胞的表达.结果 PCR、序列测定以及限制性酶切证实KLK8基因正确插入腺病毒表达载体,并在AD-293细胞中包装出重组腺病毒;收获病毒的滴度为3.16×1012 IU/mL.结论 成功构建pAd-KLK8重组腺病毒表达载体,且重组腺病毒在Hela细胞能有效表达.
目的 構建大鼠組織激肽釋放酶8(KLK8)的腺病毒錶達載體,為進一步研究KLK8對心肌細胞的作用提供實驗基礎.方法 採用AdEasy繫統構建攜帶外源性KLK8編碼基因的重組腺病毒載體pAd-KLK8,轉染AD-293細胞包裝產生重組腺病毒Ad-KLK8,TCID50法對收穫病毒進行滴度鑒定,RT-PCR及Western-blot方法檢測目的基因在Hela細胞的錶達.結果 PCR、序列測定以及限製性酶切證實KLK8基因正確插入腺病毒錶達載體,併在AD-293細胞中包裝齣重組腺病毒;收穫病毒的滴度為3.16×1012 IU/mL.結論 成功構建pAd-KLK8重組腺病毒錶達載體,且重組腺病毒在Hela細胞能有效錶達.
목적 구건대서조직격태석방매8(KLK8)적선병독표체재체,위진일보연구KLK8대심기세포적작용제공실험기출.방법 채용AdEasy계통구건휴대외원성KLK8편마기인적중조선병독재체pAd-KLK8,전염AD-293세포포장산생중조선병독Ad-KLK8,TCID50법대수획병독진행적도감정,RT-PCR급Western-blot방법검측목적기인재Hela세포적표체.결과 PCR、서렬측정이급한제성매절증실KLK8기인정학삽입선병독표체재체,병재AD-293세포중포장출중조선병독;수획병독적적도위3.16×1012 IU/mL.결론 성공구건pAd-KLK8중조선병독표체재체,차중조선병독재Hela세포능유효표체.
