江西师范大学学报（自然科学版）
江西師範大學學報（自然科學版）
강서사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF JIANGXI NORMAL UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES EDITION）
2013年
2期
159-161
,共3页
粉尘螨%Der f15%克隆%载体构建
粉塵螨%Der f15%剋隆%載體構建
분진만%Der f15%극륭%재체구건
dermatophagoides farina%Der f15%cloning%vectorconstruction
先挑取纯培养的粉尘螨,提取总的RNA,后采用RT-PCR方法进行反转录出cDNA.由cDNA提取出目的基因进行片段扩增,产物连接入T载体(pMD18-T).经扩增后,用EcoR I和Xho I双酶切,将目的基因分别连接到pET28和pET32的表达载体上,得到重组质粒pET28和pET32,即粉尘螨的基因克隆与 表达载体构建成功.
先挑取純培養的粉塵螨,提取總的RNA,後採用RT-PCR方法進行反轉錄齣cDNA.由cDNA提取齣目的基因進行片段擴增,產物連接入T載體(pMD18-T).經擴增後,用EcoR I和Xho I雙酶切,將目的基因分彆連接到pET28和pET32的錶達載體上,得到重組質粒pET28和pET32,即粉塵螨的基因剋隆與 錶達載體構建成功.
선도취순배양적분진만,제취총적RNA,후채용RT-PCR방법진행반전록출cDNA.유cDNA제취출목적기인진행편단확증,산물련접입T재체(pMD18-T).경확증후,용EcoR I화Xho I쌍매절,장목적기인분별련접도pET28화pET32적표체재체상,득도중조질립pET28화pET32,즉분진만적기인극륭여 표체재체구건성공.
