广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
22期
165-168,前插4
,共5页
戴青冬%毛超%郭立佳%杜和禾%汪军%潘江禹%黄俊生
戴青鼕%毛超%郭立佳%杜和禾%汪軍%潘江禹%黃俊生
대청동%모초%곽립가%두화화%왕군%반강우%황준생
香蕉枯萎病%1号生理小种%根癌农杆菌%突变体%转化
香蕉枯萎病%1號生理小種%根癌農桿菌%突變體%轉化
향초고위병%1호생리소충%근암농간균%돌변체%전화
针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小种(Fusarium oxysporumf.sp cubense race 1,Foc1),以潮毒素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间28～30 h(200 r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200 μmol/L、共培养温度为25C、IM固体培养基pH值为5.5.在此条件下,转化效率能达到150～200个转化子/106个Foc1孢子.在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单.在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光.潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定.
針對香蕉枯萎病病原菌的1號生理小種(Fusarium oxysporumf.sp cubense race 1,Foc1),以潮毒素抗性為選擇標記,建立瞭根癌農桿菌介導的轉化體繫,確定影響轉化效率主要因子是:YEB平闆上單菌落培養時間為40h、在LB液體搖床培養中培養時間28～30 h(200 r/min)、乙酰丁香酮(AS)濃度為200 μmol/L、共培養溫度為25C、IM固體培養基pH值為5.5.在此條件下,轉化效率能達到150～200箇轉化子/106箇Foc1孢子.在選擇性培養基篩選轉化子時,我們首次採用瞭直接覆蓋選擇性培養基方法,比傳統的轉膜反貼方法更方便簡單.在熒光顯微鏡下觀察到轉化子的綠色熒光.潮黴素抗性測試髮現轉化子的抗性錶現穩定.
침대향초고위병병원균적1호생리소충(Fusarium oxysporumf.sp cubense race 1,Foc1),이조독소항성위선택표기,건립료근암농간균개도적전화체계,학정영향전화효솔주요인자시:YEB평판상단균락배양시간위40h、재LB액체요상배양중배양시간28～30 h(200 r/min)、을선정향동(AS)농도위200 μmol/L、공배양온도위25C、IM고체배양기pH치위5.5.재차조건하,전화효솔능체도150～200개전화자/106개Foc1포자.재선택성배양기사선전화자시,아문수차채용료직접복개선택성배양기방법,비전통적전막반첩방법경방편간단.재형광현미경하관찰도전화자적록색형광.조매소항성측시발현전화자적항성표현은정.
