日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析
일본혈흡충TOM34기인적극륭화표체분석
Cloning,expression and characterization of a gene encoding translocase of the outer mitochondrial membrane 34(TOM34)in Schistosoma japonicum
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2013年 2期 122-128 ,共7页

    洪炀%李学珍%傅志强%石耀军%陆珂%杨健美%朱传刚%苑纯秀%李浩%李祥瑞%林矫矫

    홍양%리학진%부지강%석요군%륙가%양건미%주전강%원순수%리호%리상서%림교교

    日本血吸虫%线粒体外膜转运酶34%克隆%表达%免疫定位 日本血吸蟲%線粒體外膜轉運酶34%剋隆%錶達%免疫定位
    일본혈흡충%선립체외막전운매34%극륭%표체%면역정위
    目的 克隆、表达日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(SjTOM34),并对其生物特性进行初步研究.方法 应用RT-PCR方法从42 d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因,并进行生物信息学分析.应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达状况.构建了SjTOM34基因重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,Western blotting分析了重组抗原的免疫原性及该蛋白在不同发育阶段虫体中的表达情况,利用免疫组化方法观察了该蛋白在虫体内的分布情况.结果 获得了SjTOM34的基因序列,其开放阅读框(ORF)为1 083 bp.该基因在所检测的不同发育阶段童虫和成虫中均有表达,其中在35 d虫体中的表达量略高于其他时期的虫体.成功构建了重组的原核表达质粒并且在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白在上清和沉淀中都有存在,并且具有较好的免疫原性,在所检测的各时期虫体中均可检测到该蛋白的存在,并且主要分布在虫体的实质组织中.结论 获得了日本血吸虫SjTOM34基因,初步明确了该基因在日本血吸虫童虫和成虫中的表达情况,及在成虫中的分布.
    목적 극륭、표체일본혈흡충선립체외막전운매34기인(SjTOM34),병대기생물특성진행초보연구.방법 응용RT-PCR방법종42 d일본혈흡충성충cDNA중확증SjTOM34기인,병진행생물신식학분석.응용실시정량RT-PCR방법분석료SjTOM34기인재일본혈흡충불동발육계단충체중적표체상황.구건료SjTOM34기인중조원핵표체질립,병재대장간균중진행표체,Western blotting분석료중조항원적면역원성급해단백재불동발육계단충체중적표체정황,이용면역조화방법관찰료해단백재충체내적분포정황.결과 획득료SjTOM34적기인서렬,기개방열독광(ORF)위1 083 bp.해기인재소검측적불동발육계단동충화성충중균유표체,기중재35 d충체중적표체량략고우기타시기적충체.성공구건료중조적원핵표체질립병차재대장간균중획득표체,중조단백재상청화침정중도유존재,병차구유교호적면역원성,재소검측적각시기충체중균가검측도해단백적존재,병차주요분포재충체적실질조직중.결론 획득료일본혈흡충SjTOM34기인,초보명학료해기인재일본혈흡충동충화성충중적표체정황,급재성충중적분포.
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