江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
12期
19-22
,共4页
程祖锌%何海华%黄志伟%许明%黄昕颖%郑金贵
程祖鋅%何海華%黃誌偉%許明%黃昕穎%鄭金貴
정조자%하해화%황지위%허명%황흔영%정금귀
菠菜%硝酸还原酶%基因克隆%原核表达
菠菜%硝痠還原酶%基因剋隆%原覈錶達
파채%초산환원매%기인극륭%원핵표체
利用RT-PCR技术从低富集硝酸盐的菠菜品种中克隆得到硝酸还原酶(NR)基因,并进行了同源性分析；构建该基因的原核表达载体pET-NR,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达,为深入研究并揭示菠菜的硝酸盐富集机制奠定了基础.结果表明:获得的NR基因包含完整的开放阅读框(2 781 bp),编码926个氨基酸,与菠菜、甜菜NR核苷酸序列的同源性分别为99％、80％,与其氨基酸序列的相同性分别为99％、86％.SDS-PAGE电泳显示重组菌经IPTG诱导表达出104 ku左右的蛋白质,与预期大小一致.
利用RT-PCR技術從低富集硝痠鹽的菠菜品種中剋隆得到硝痠還原酶(NR)基因,併進行瞭同源性分析；構建該基因的原覈錶達載體pET-NR,轉入大腸埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG進行誘導錶達,為深入研究併揭示菠菜的硝痠鹽富集機製奠定瞭基礎.結果錶明:穫得的NR基因包含完整的開放閱讀框(2 781 bp),編碼926箇氨基痠,與菠菜、甜菜NR覈苷痠序列的同源性分彆為99％、80％,與其氨基痠序列的相同性分彆為99％、86％.SDS-PAGE電泳顯示重組菌經IPTG誘導錶達齣104 ku左右的蛋白質,與預期大小一緻.
이용RT-PCR기술종저부집초산염적파채품충중극륭득도초산환원매(NR)기인,병진행료동원성분석；구건해기인적원핵표체재체pET-NR,전입대장애희균BL21(DE3)중,용IPTG진행유도표체,위심입연구병게시파채적초산염부집궤제전정료기출.결과표명:획득적NR기인포함완정적개방열독광(2 781 bp),편마926개안기산,여파채、첨채NR핵감산서렬적동원성분별위99％、80％,여기안기산서렬적상동성분별위99％、86％.SDS-PAGE전영현시중조균경IPTG유도표체출104 ku좌우적단백질,여예기대소일치.
