浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2013年
1期
1-10
,共10页
Argonaute%AtAGO2%亚细胞定位%核定位%抗病性
Argonaute%AtAGO2%亞細胞定位%覈定位%抗病性
Argonaute%AtAGO2%아세포정위%핵정위%항병성
Argonaute (AGO)是一类高度保守的蛋白,对基因沉默和植物抗病性起重要调控作用.为进一步了解AGO作用机制,今采用生物信息学技术对拟南芥AGO蛋白各成员的细胞定位进行预测,并对AtAGO2进行亚细胞定位分析.10个拟南芥AGO蛋白均不含信号肽序列,表明它们不是外泌蛋白.AtAGO1,AtAGO2,AtAGO3,AtAGO4和AtAGO9带有核定位信号,但携带的核定位信号肽序列各不相同,显示这些AGO蛋白可能定位于细胞核.通过克隆AtAGO2全长序列,构建获得与报告基因eGFP融合表达的细胞定位检测载体pCHF3-eGFP::AtAGO2,采用农杆菌介导的方法将其瞬时表达于本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中,激光共聚焦显微镜观察结果表明,AtAGO2蛋白定位于细胞质和细胞核中.茉莉酸(jasmonic acid,JA)处理诱导AtAGO2蛋白在细胞质膜及其周围“颗粒化”聚集,但抗病诱导剂苯并噻二唑(benzothiodiazole,BTH)处理不影响AtAGO2蛋白的亚细胞定位.这些结果说明AtAGO2可能通过JA途径参与植物抗病性的调控.
Argonaute (AGO)是一類高度保守的蛋白,對基因沉默和植物抗病性起重要調控作用.為進一步瞭解AGO作用機製,今採用生物信息學技術對擬南芥AGO蛋白各成員的細胞定位進行預測,併對AtAGO2進行亞細胞定位分析.10箇擬南芥AGO蛋白均不含信號肽序列,錶明它們不是外泌蛋白.AtAGO1,AtAGO2,AtAGO3,AtAGO4和AtAGO9帶有覈定位信號,但攜帶的覈定位信號肽序列各不相同,顯示這些AGO蛋白可能定位于細胞覈.通過剋隆AtAGO2全長序列,構建穫得與報告基因eGFP融閤錶達的細胞定位檢測載體pCHF3-eGFP::AtAGO2,採用農桿菌介導的方法將其瞬時錶達于本氏煙(Nicotiana benthamiana)葉片中,激光共聚焦顯微鏡觀察結果錶明,AtAGO2蛋白定位于細胞質和細胞覈中.茉莉痠(jasmonic acid,JA)處理誘導AtAGO2蛋白在細胞質膜及其週圍“顆粒化”聚集,但抗病誘導劑苯併噻二唑(benzothiodiazole,BTH)處理不影響AtAGO2蛋白的亞細胞定位.這些結果說明AtAGO2可能通過JA途徑參與植物抗病性的調控.
Argonaute (AGO)시일류고도보수적단백,대기인침묵화식물항병성기중요조공작용.위진일보료해AGO작용궤제,금채용생물신식학기술대의남개AGO단백각성원적세포정위진행예측,병대AtAGO2진행아세포정위분석.10개의남개AGO단백균불함신호태서렬,표명타문불시외비단백.AtAGO1,AtAGO2,AtAGO3,AtAGO4화AtAGO9대유핵정위신호,단휴대적핵정위신호태서렬각불상동,현시저사AGO단백가능정위우세포핵.통과극륭AtAGO2전장서렬,구건획득여보고기인eGFP융합표체적세포정위검측재체pCHF3-eGFP::AtAGO2,채용농간균개도적방법장기순시표체우본씨연(Nicotiana benthamiana)협편중,격광공취초현미경관찰결과표명,AtAGO2단백정위우세포질화세포핵중.말리산(jasmonic acid,JA)처리유도AtAGO2단백재세포질막급기주위“과립화”취집,단항병유도제분병새이서(benzothiodiazole,BTH)처리불영향AtAGO2단백적아세포정위.저사결과설명AtAGO2가능통과JA도경삼여식물항병성적조공.
