光谱实验室
光譜實驗室
광보실험실
CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY
2013年
2期
882-886
,共5页
固相金属亲和层析%全长入过氧化物酶体增殖物激活受体y%活性
固相金屬親和層析%全長入過氧化物酶體增殖物激活受體y%活性
고상금속친화층석%전장입과양화물매체증식물격활수체y%활성
建立全长人PPARγ重组蛋白的固相金属亲和层析纯化方法.利用E.coli BL21 (DE3)细胞外源性表达出全长人PPARγ重组蛋白,采用固相金属亲和层析法纯化目标蛋白.通过考察咪唑浓度对纯化的影响,确定在8 mol/L尿素下,用含50 mmol/L咪唑的缓冲液冲洗,200mmol/L咪唑缓冲液洗脱,可获得纯度为95％的目标蛋白,透析复性后经放射配体受体饱和结合实验测定全长人PPARγ重组蛋白的解离常数Kd为106士6nmol/L.结果表明本文所建立的方法能够成功纯化出高纯度的目标蛋白,经复性后,可获得用于结构和功能研究的全长人PPARγ重组蛋白.
建立全長人PPARγ重組蛋白的固相金屬親和層析純化方法.利用E.coli BL21 (DE3)細胞外源性錶達齣全長人PPARγ重組蛋白,採用固相金屬親和層析法純化目標蛋白.通過攷察咪唑濃度對純化的影響,確定在8 mol/L尿素下,用含50 mmol/L咪唑的緩遲液遲洗,200mmol/L咪唑緩遲液洗脫,可穫得純度為95％的目標蛋白,透析複性後經放射配體受體飽和結閤實驗測定全長人PPARγ重組蛋白的解離常數Kd為106士6nmol/L.結果錶明本文所建立的方法能夠成功純化齣高純度的目標蛋白,經複性後,可穫得用于結構和功能研究的全長人PPARγ重組蛋白.
건립전장인PPARγ중조단백적고상금속친화층석순화방법.이용E.coli BL21 (DE3)세포외원성표체출전장인PPARγ중조단백,채용고상금속친화층석법순화목표단백.통과고찰미서농도대순화적영향,학정재8 mol/L뇨소하,용함50 mmol/L미서적완충액충세,200mmol/L미서완충액세탈,가획득순도위95％적목표단백,투석복성후경방사배체수체포화결합실험측정전장인PPARγ중조단백적해리상수Kd위106사6nmol/L.결과표명본문소건립적방법능구성공순화출고순도적목표단백,경복성후,가획득용우결구화공능연구적전장인PPARγ중조단백.
