国际妇产科学杂志
國際婦產科學雜誌
국제부산과학잡지
JOURNAL OF INTERNATIONAL OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2013年
2期
176-178,186,封3
,共5页
刘龙阳%姚婷婷%易娟娟%陈勍%张丙忠%周晖%彭永排%林仲秋
劉龍暘%姚婷婷%易娟娟%陳勍%張丙忠%週暉%彭永排%林仲鞦
류룡양%요정정%역연연%진경%장병충%주휘%팽영배%림중추
ALDH1A1%RNA,小分子干扰%转染%HeLa细胞
ALDH1A1%RNA,小分子榦擾%轉染%HeLa細胞
ALDH1A1%RNA,소분자간우%전염%HeLa세포
目的:采用shRNA转染构建干扰乙醛脱氢酶-1(ALDH1A1)表达的宫颈癌HeLa细胞,以进一步探讨ALDH1A1与宫颈癌细胞的生物学特性之间的关系.方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,加入梯度浓度G418溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度；取对数生长期细胞,采用Lipofectamine 2000脂质体将4种干扰重组质粒(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一种具最佳干扰效果)及1种阴性对照质粒(shNC)转染宫颈癌HeLa细胞.5种重组质粒与Lipofectamine 2000脂质体的比例均为0.2 μg:1 μL,空白对照组中仅加入Lipofectamine 2000脂质体.6h后换液,24h后荧光显微镜下观察荧光表达情况.结果:确定G418的最佳筛选浓度为400 mg/L；5种重组质粒均成功转染人HeLa细胞中.其中ALDH1A1-1719的转染效率为4.67％;ALDH1A1-574的转染效率为1.16％；ALDH1A1-740的转染效率为12.45％；ALDH1A1-921的转染效率为3.42％；shNC组的转染效率为1.02％.结论:干扰ALDH1A1表达的shRNA载体转染宫颈腺癌HeLa细胞成功可行且效果好.
目的:採用shRNA轉染構建榦擾乙醛脫氫酶-1(ALDH1A1)錶達的宮頸癌HeLa細胞,以進一步探討ALDH1A1與宮頸癌細胞的生物學特性之間的關繫.方法:體外培養宮頸癌HeLa細胞,加入梯度濃度G418溶液進行篩選,確定最佳篩選濃度；取對數生長期細胞,採用Lipofectamine 2000脂質體將4種榦擾重組質粒(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一種具最佳榦擾效果)及1種陰性對照質粒(shNC)轉染宮頸癌HeLa細胞.5種重組質粒與Lipofectamine 2000脂質體的比例均為0.2 μg:1 μL,空白對照組中僅加入Lipofectamine 2000脂質體.6h後換液,24h後熒光顯微鏡下觀察熒光錶達情況.結果:確定G418的最佳篩選濃度為400 mg/L；5種重組質粒均成功轉染人HeLa細胞中.其中ALDH1A1-1719的轉染效率為4.67％;ALDH1A1-574的轉染效率為1.16％；ALDH1A1-740的轉染效率為12.45％；ALDH1A1-921的轉染效率為3.42％；shNC組的轉染效率為1.02％.結論:榦擾ALDH1A1錶達的shRNA載體轉染宮頸腺癌HeLa細胞成功可行且效果好.
목적:채용shRNA전염구건간우을철탈경매-1(ALDH1A1)표체적궁경암HeLa세포,이진일보탐토ALDH1A1여궁경암세포적생물학특성지간적관계.방법:체외배양궁경암HeLa세포,가입제도농도G418용액진행사선,학정최가사선농도；취대수생장기세포,채용Lipofectamine 2000지질체장4충간우중조질립(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,기중유일충구최가간우효과)급1충음성대조질립(shNC)전염궁경암HeLa세포.5충중조질립여Lipofectamine 2000지질체적비례균위0.2 μg:1 μL,공백대조조중부가입Lipofectamine 2000지질체.6h후환액,24h후형광현미경하관찰형광표체정황.결과:학정G418적최가사선농도위400 mg/L；5충중조질립균성공전염인HeLa세포중.기중ALDH1A1-1719적전염효솔위4.67％;ALDH1A1-574적전염효솔위1.16％；ALDH1A1-740적전염효솔위12.45％；ALDH1A1-921적전염효솔위3.42％；shNC조적전염효솔위1.02％.결론:간우ALDH1A1표체적shRNA재체전염궁경선암HeLa세포성공가행차효과호.
