光谱实验室
光譜實驗室
광보실험실
CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY
2013年
2期
555-560
,共6页
夏铸%丁惠惠%张万萍%余瑜
夏鑄%丁惠惠%張萬萍%餘瑜
하주%정혜혜%장만평%여유
全长hPPARγ重组蛋白%纯化%活性
全長hPPARγ重組蛋白%純化%活性
전장hPPARγ중조단백%순화%활성
建立细菌外源性表达的有活性的全长hPPARγ重组蛋白的纯化方法.利用pReceiver-B13-SUMO-PPARγ表达质粒转化至E.coli BL21 (DE3)细胞中诱导表达获得的全长hPPARγ重组蛋白；采用阴离子交换色谱法纯化目标蛋白;采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定全长hPPARγ重组蛋白与Ros (Rosiglitazone,罗格列酮)配体的结合活性.经DEAE-52阴离子交换树脂一次纯化,从每升LB培养介质中可获得135mg、纯度为80％目标蛋白;该蛋白与罗格列酮的解离常数Kd为492nmol/L.本文所建立的方法能纯化出大量有活性、纯度较高的全长hPPARγ重组蛋白.
建立細菌外源性錶達的有活性的全長hPPARγ重組蛋白的純化方法.利用pReceiver-B13-SUMO-PPARγ錶達質粒轉化至E.coli BL21 (DE3)細胞中誘導錶達穫得的全長hPPARγ重組蛋白；採用陰離子交換色譜法純化目標蛋白;採用分子排阻色譜-高效液相色譜法(SEC-HPLC)法測定全長hPPARγ重組蛋白與Ros (Rosiglitazone,囉格列酮)配體的結閤活性.經DEAE-52陰離子交換樹脂一次純化,從每升LB培養介質中可穫得135mg、純度為80％目標蛋白;該蛋白與囉格列酮的解離常數Kd為492nmol/L.本文所建立的方法能純化齣大量有活性、純度較高的全長hPPARγ重組蛋白.
건립세균외원성표체적유활성적전장hPPARγ중조단백적순화방법.이용pReceiver-B13-SUMO-PPARγ표체질립전화지E.coli BL21 (DE3)세포중유도표체획득적전장hPPARγ중조단백；채용음리자교환색보법순화목표단백;채용분자배조색보-고효액상색보법(SEC-HPLC)법측정전장hPPARγ중조단백여Ros (Rosiglitazone,라격렬동)배체적결합활성.경DEAE-52음리자교환수지일차순화,종매승LB배양개질중가획득135mg、순도위80％목표단백;해단백여라격렬동적해리상수Kd위492nmol/L.본문소건립적방법능순화출대량유활성、순도교고적전장hPPARγ중조단백.
