大连海洋大学学报
大連海洋大學學報
대련해양대학학보
JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY
2013年
2期
148-153
,共6页
孙志鹏%徐祥%李强%叶仕根%李华
孫誌鵬%徐祥%李彊%葉仕根%李華
손지붕%서상%리강%협사근%리화
虹彩病毒%跨膜蛋白%原核表达
虹綵病毒%跨膜蛋白%原覈錶達
홍채병독%과막단백%원핵표체
克隆了真鲷虹彩病毒辽宁株(RSlV-LN09)跨膜蛋白(ORF049L)基因,利用生物信息学方法,对该基因编码蛋白的跨膜区及B细胞抗原位点等特征进行了分析.随后将该序列连接至pET-28a表达载体中,成功构建了pET-28a-ORFF049L原核表达质粒.将表达质粒转化至BL21 (DE3)菌株后,经IPTG诱导获得大量携带组氨酸标签的融合蛋白.该融合蛋白经变性后采用镍层析柱进行亲和纯化,纯化蛋白再经SDS-PAGE和Western blot分析,确认获得了相对分子质量约为17 000的高纯度重组蛋白His-049L.本研究结果为病毒跨膜蛋白单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础.
剋隆瞭真鯛虹綵病毒遼寧株(RSlV-LN09)跨膜蛋白(ORF049L)基因,利用生物信息學方法,對該基因編碼蛋白的跨膜區及B細胞抗原位點等特徵進行瞭分析.隨後將該序列連接至pET-28a錶達載體中,成功構建瞭pET-28a-ORFF049L原覈錶達質粒.將錶達質粒轉化至BL21 (DE3)菌株後,經IPTG誘導穫得大量攜帶組氨痠標籤的融閤蛋白.該融閤蛋白經變性後採用鎳層析柱進行親和純化,純化蛋白再經SDS-PAGE和Western blot分析,確認穫得瞭相對分子質量約為17 000的高純度重組蛋白His-049L.本研究結果為病毒跨膜蛋白單剋隆抗體的製備及其功能研究奠定瞭基礎.
극륭료진조홍채병독료녕주(RSlV-LN09)과막단백(ORF049L)기인,이용생물신식학방법,대해기인편마단백적과막구급B세포항원위점등특정진행료분석.수후장해서렬련접지pET-28a표체재체중,성공구건료pET-28a-ORFF049L원핵표체질립.장표체질립전화지BL21 (DE3)균주후,경IPTG유도획득대량휴대조안산표첨적융합단백.해융합단백경변성후채용얼층석주진행친화순화,순화단백재경SDS-PAGE화Western blot분석,학인획득료상대분자질량약위17 000적고순도중조단백His-049L.본연구결과위병독과막단백단극륭항체적제비급기공능연구전정료기출.
