上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2013年
4期
385-391
,共7页
李肖瑛%顾乐怡%倪兆慧%梁馨月%严玉澄%钱家麒
李肖瑛%顧樂怡%倪兆慧%樑馨月%嚴玉澄%錢傢麒
리초영%고악이%예조혜%량형월%엄옥징%전가기
代谢型谷氨酸受体1%代谢型谷氨酸受体5%足细胞%细胞凋亡%环磷酸腺苷
代謝型穀氨痠受體1%代謝型穀氨痠受體5%足細胞%細胞凋亡%環燐痠腺苷
대사형곡안산수체1%대사형곡안산수체5%족세포%세포조망%배린산선감
目的 研究代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)和mGluR5的激动剂3,5-二羟基苯甘氨酸(DHPG)在体外对由氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的足细胞凋亡的影响,探讨可能的作用途径.方法 体外培养小鼠条件永生型足细胞株5P12,根据添加干预药物的不同进行分组.采用CCK-8法、Western blotting 、EIA法、JC-1单标法流式细胞术、免疫荧光法和TUNEL染色激光共聚焦显微镜观察等方法,对足细胞的细胞活力、mGluR1/5和活化的胱冬肽酶-3(cleaved caspase-3)的表达、环磷酸腺苷(cAMP)水平、线粒体膜电位变化、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(CREB)及细胞凋亡等指标进行检测.结果 DHPG诱导足细胞使cAMP生成和CREB表达增加,DHPG可防止PAN诱导的足细胞活力降低、cleaved caspase-3表达升高、线粒体膜电位下降以及晚期凋亡,而这些作用可被mGluR1和mGluR5的选择性拮抗剂(AIDA)、腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)及mGluR1和mGluR5的RNA干扰加以抑制.结论 mGluR1和mGluR5的选择性激动剂DHPG可防止体外PAN诱导的足细胞凋亡,其作用可能与mGluR/cAMP信号途径有关.
目的 研究代謝型穀氨痠受體1(mGluR1)和mGluR5的激動劑3,5-二羥基苯甘氨痠(DHPG)在體外對由氨基覈苷嘌呤黴素(PAN)誘導的足細胞凋亡的影響,探討可能的作用途徑.方法 體外培養小鼠條件永生型足細胞株5P12,根據添加榦預藥物的不同進行分組.採用CCK-8法、Western blotting 、EIA法、JC-1單標法流式細胞術、免疫熒光法和TUNEL染色激光共聚焦顯微鏡觀察等方法,對足細胞的細胞活力、mGluR1/5和活化的胱鼕肽酶-3(cleaved caspase-3)的錶達、環燐痠腺苷(cAMP)水平、線粒體膜電位變化、燐痠化cAMP反應元件結閤蛋白(CREB)及細胞凋亡等指標進行檢測.結果 DHPG誘導足細胞使cAMP生成和CREB錶達增加,DHPG可防止PAN誘導的足細胞活力降低、cleaved caspase-3錶達升高、線粒體膜電位下降以及晚期凋亡,而這些作用可被mGluR1和mGluR5的選擇性拮抗劑(AIDA)、腺苷痠環化酶抑製劑(SQ22536)及mGluR1和mGluR5的RNA榦擾加以抑製.結論 mGluR1和mGluR5的選擇性激動劑DHPG可防止體外PAN誘導的足細胞凋亡,其作用可能與mGluR/cAMP信號途徑有關.
목적 연구대사형곡안산수체1(mGluR1)화mGluR5적격동제3,5-이간기분감안산(DHPG)재체외대유안기핵감표령매소(PAN)유도적족세포조망적영향,탐토가능적작용도경.방법 체외배양소서조건영생형족세포주5P12,근거첨가간예약물적불동진행분조.채용CCK-8법、Western blotting 、EIA법、JC-1단표법류식세포술、면역형광법화TUNEL염색격광공취초현미경관찰등방법,대족세포적세포활력、mGluR1/5화활화적광동태매-3(cleaved caspase-3)적표체、배린산선감(cAMP)수평、선립체막전위변화、린산화cAMP반응원건결합단백(CREB)급세포조망등지표진행검측.결과 DHPG유도족세포사cAMP생성화CREB표체증가,DHPG가방지PAN유도적족세포활력강저、cleaved caspase-3표체승고、선립체막전위하강이급만기조망,이저사작용가피mGluR1화mGluR5적선택성길항제(AIDA)、선감산배화매억제제(SQ22536)급mGluR1화mGluR5적RNA간우가이억제.결론 mGluR1화mGluR5적선택성격동제DHPG가방지체외PAN유도적족세포조망,기작용가능여mGluR/cAMP신호도경유관.
