食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2012年
11期
1136-1141
,共6页
李剑芳%赵顺阁%邬敏辰%张慧敏%魏喜换
李劍芳%趙順閣%鄔敏辰%張慧敏%魏喜換
리검방%조순각%오민신%장혜민%위희환
β-甘露聚糖酶%木聚糖酶%共表达%条件优化
β-甘露聚糖酶%木聚糖酶%共錶達%條件優化
β-감로취당매%목취당매%공표체%조건우화
为实现β-甘露聚糖酶基因和木聚糖酶基因在毕赤酵母中的共表达,作者将经SalⅠ线性化的pPIC9K-xynⅡ电转化至工程菌GS115/Anman5A中,经G418浓度梯度筛选后获得能同时高产β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的双重重组子GS115/Anman5A-xynⅡ.SDS-PAGE显示目的蛋白的相对分子质量分别约为52 000,24 100.摇瓶发酵筛选出产酶活性最强的转化株,命名为GSM X2,随后对该菌株的表达条件进行初步优化,优化后的表达条件为:诱导时间120 h,培养基起始pH值为7.0,甘油添加量为1.5％,甲醇添加量为1.5％.在此培养条件下,产β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的活性分别达到37.1 U/mL和193.6 U/mL.
為實現β-甘露聚糖酶基因和木聚糖酶基因在畢赤酵母中的共錶達,作者將經SalⅠ線性化的pPIC9K-xynⅡ電轉化至工程菌GS115/Anman5A中,經G418濃度梯度篩選後穫得能同時高產β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的雙重重組子GS115/Anman5A-xynⅡ.SDS-PAGE顯示目的蛋白的相對分子質量分彆約為52 000,24 100.搖瓶髮酵篩選齣產酶活性最彊的轉化株,命名為GSM X2,隨後對該菌株的錶達條件進行初步優化,優化後的錶達條件為:誘導時間120 h,培養基起始pH值為7.0,甘油添加量為1.5％,甲醇添加量為1.5％.在此培養條件下,產β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的活性分彆達到37.1 U/mL和193.6 U/mL.
위실현β-감로취당매기인화목취당매기인재필적효모중적공표체,작자장경SalⅠ선성화적pPIC9K-xynⅡ전전화지공정균GS115/Anman5A중,경G418농도제도사선후획득능동시고산β-감로취당매화목취당매적쌍중중조자GS115/Anman5A-xynⅡ.SDS-PAGE현시목적단백적상대분자질량분별약위52 000,24 100.요병발효사선출산매활성최강적전화주,명명위GSM X2,수후대해균주적표체조건진행초보우화,우화후적표체조건위:유도시간120 h,배양기기시pH치위7.0,감유첨가량위1.5％,갑순첨가량위1.5％.재차배양조건하,산β-감로취당매화목취당매적활성분별체도37.1 U/mL화193.6 U/mL.
