CAJ | 학술논문

目的观察miRNA765高表达对胃癌顺铂(CDDP)耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响.方法将PCR扩增的包含miRNA765前体的基因序列克隆至真核表达载体,构建miRNA重组表达载体；阳离子脂质体转染重组质粒到BGC-823/CDDP细胞.转染后48 h,Real-Time PCR和Western blotting法分别检测细胞中miRNA765和细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)蛋白的相对表达量；采用不同浓度CDDP处理转染后48 h的BGC-823/CDDP细胞,24和48 h后MTT法检测细胞活性并计算细胞对于CDDP的半抑制浓度(IC50).采用终质量浓度为1μg/mL的CDDP处理基因干预后的BGC-823/CDDP细胞,双染法检测细胞凋亡率.结果 BGC-823/CDDP细胞内miRNA765的相对表达量明显低于其亲本细胞BGC-823,CIAPIN1蛋白相对表达量则明显高于其亲本细胞株(均P＜0.01).在BGC-823/CDDP细胞内高表达miRNA765可明显抑制CIAPIN1蛋白的表达,转染后48 h的CIAPIN1蛋白表达量明显低于未转染组(P＜0.01)；miRNA765高表达可明显降低BGC-823/CDDP细胞的耐药能力,48 h后IC50值从(18.27 ±3.92) μg/mL降至(1.50 ±0.43) μg/mL(P ＜0.05).转染48 h后,BGC-823/CDDP细胞的凋亡率从(10.1±1.7)％上升至(53.4±7.9)％(P＜0.01).结论 miRNA765高表达可以明显降低胃癌耐药细胞株BGC-823/CDDP的耐药能力.
목적 관찰miRNA765고표체대위암순박(CDDP)내약세포주BGC-823/CDDP내약성적영향.방법 장PCR확증적포함miRNA765전체적기인서렬극륭지진핵표체재체,구건miRNA중조표체재체；양리자지질체전염중조질립도BGC-823/CDDP세포.전염후48 h,Real-Time PCR화Western blotting법분별검측세포중miRNA765화세포인자유도적조망억제인자1(CIAPIN1)단백적상대표체량；채용불동농도CDDP처리전염후48 h적BGC-823/CDDP세포,24화48 h후MTT법검측세포활성병계산세포대우CDDP적반억제농도(IC50).채용종질량농도위1μg/mL적CDDP처리기인간예후적BGC-823/CDDP세포,쌍염법검측세포조망솔.결과 BGC-823/CDDP세포내miRNA765적상대표체량명현저우기친본세포BGC-823,CIAPIN1단백상대표체량칙명현고우기친본세포주(균P＜0.01).재BGC-823/CDDP세포내고표체miRNA765가명현억제CIAPIN1단백적표체,전염후48 h적CIAPIN1단백표체량명현저우미전염조(P＜0.01)；miRNA765고표체가명현강저BGC-823/CDDP세포적내약능력,48 h후IC50치종(18.27 ±3.92) μg/mL강지(1.50 ±0.43) μg/mL(P ＜0.05).전염48 h후,BGC-823/CDDP세포적조망솔종(10.1±1.7)％상승지(53.4±7.9)％(P＜0.01).결론 miRNA765고표체가이명현강저위암내약세포주BGC-823/CDDP적내약능력.