CAJ | 학술논문

目的:体外观察长程缺氧环境对结肠癌细胞SW480和HCT116增殖能力的影响并探讨其可能的作用机制.方法:缺氧培养结肠癌SW480和HCT116细胞14～28 d,采用MTT法和平板克隆法检测缺氧条件下2种结肠癌细胞增殖能力的改变；激光共聚焦显微镜下观察缺氧诱导因子-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和Wnt/β-catenin信号通路关键因子β-catenin的表达；蛋白质印迹法检测HIF-1α和β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、Ser9被磷酸化的GSK-3β [phospho-glycogen synthase kinase-3β (Ser9),pGSK-3β (Ser9)]以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达.以常氧下培养的这2种细胞作为对照.结果:细胞生长曲线和平板克隆检测结果均显示,长程缺氧适应后SW480和HCT116细胞的增殖能力较常氧下明显增强(P＜0.01)；激光共聚焦显微镜下观察发现,HCT116细胞在缺氧条件下HIF-1α的表达部位发生改变；蛋白质印迹法检测发现,与常氧组比较长程缺氧组细胞中HIF-1α(P＜0.05)、β-catenin (P＜0.05)和pGSK-3β (Ser9) (P＜0.01)蛋白的表达均上调,而总GSK-3β的表达无明显变化,PCNA在缺氧条件下表达上调(与常氧组比较,在SW480细胞中P＜0.05,在HCT116细胞中P＜0.01).结论:缺氧适应可促进结肠癌细胞SW480和HCT116的增殖,这可能是HIF-1α与Wnt/β-catenin信号转导通路共同作用的结果.
목적:체외관찰장정결양배경대결장암세포SW480화HCT116증식능력적영향병탐토기가능적작용궤제.방법:결양배양결장암SW480화HCT116세포14～28 d,채용MTT법화평판극륭법검측결양조건하2충결장암세포증식능력적개변；격광공취초현미경하관찰결양유도인자-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)화Wnt/β-catenin신호통로관건인자β-catenin적표체；단백질인적법검측HIF-1α화β-catenin、당원합성매격매-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、Ser9피린산화적GSK-3β [phospho-glycogen synthase kinase-3β (Ser9),pGSK-3β (Ser9)]이급증식세포핵항원(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)적표체.이상양하배양적저2충세포작위대조.결과:세포생장곡선화평판극륭검측결과균현시,장정결양괄응후SW480화HCT116세포적증식능력교상양하명현증강(P＜0.01)；격광공취초현미경하관찰발현,HCT116세포재결양조건하HIF-1α적표체부위발생개변；단백질인적법검측발현,여상양조비교장정결양조세포중HIF-1α(P＜0.05)、β-catenin (P＜0.05)화pGSK-3β (Ser9) (P＜0.01)단백적표체균상조,이총GSK-3β적표체무명현변화,PCNA재결양조건하표체상조(여상양조비교,재SW480세포중P＜0.05,재HCT116세포중P＜0.01).결론:결양괄응가촉진결장암세포SW480화HCT116적증식,저가능시HIF-1α여Wnt/β-catenin신호전도통로공동작용적결과.