CAJ | 학술논문

目的:研究衣霉素(tunicamycin,TM)上调胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导凋亡敏感性的作用机制.方法:采用碘化丙啶染色的FCM法检测TM(1 μmol/L)与TRAIL(100 μg/L)单独或联合作用3、6、16、24和36 h时对SGC-7901细胞凋亡率的影响；FCM法检测TM处理前后细胞表面TRAIL受体1(TRAIL receptor 1,TRAIL-R1)、-R2、-R3和-R4的表达情况；实时荧光定量-PCR法检测TRAIL-R2 mRNA的表达情况；蛋白质印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78 kDa,GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)的表达水平；RT-PCR检测X盒结合蛋白(X-box binding protein 1,XBP1) mRNA的剪接情况.结果:TM单独作用引起的SGC-7901细胞的凋亡率低,TM和TRAIL联合作用能有效提高SGC-7901细胞的凋亡率；TM能明显上调SGC-7901细胞表面TRAIL-R2的表达水平,而对TRAIL-R1、-R3和-R4却无明显影响；TRAIL-R2 mRNA的表达水平随TM作用时间延长而相应升高；GRP78蛋白的上调和XBP-1 mRNA的剪接活化证实了TM可诱导未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的发生；CHOP蛋白的表达水平也在TM作用后上调.结论:TM通过诱导UPR上调TRAIL-R2的表达,从而增加胃癌细胞对TRAIL的敏感性,CHOP介导了TRAIL-R2的上调作用.
목적:연구의매소(tunicamycin,TM)상조위암세포대종류배사인자상관조망유도배체(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)유도조망민감성적작용궤제.방법:채용전화병정염색적FCM법검측TM(1 μmol/L)여TRAIL(100 μg/L)단독혹연합작용3、6、16、24화36 h시대SGC-7901세포조망솔적영향；FCM법검측TM처리전후세포표면TRAIL수체1(TRAIL receptor 1,TRAIL-R1)、-R2、-R3화-R4적표체정황；실시형광정량-PCR법검측TRAIL-R2 mRNA적표체정황；단백질인적법검측포도당조절단백78(glucose-regulated protein 78 kDa,GRP78)화CCAAT/증강자결합단백동원단백(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)적표체수평；RT-PCR검측X합결합단백(X-box binding protein 1,XBP1) mRNA적전접정황.결과:TM단독작용인기적SGC-7901세포적조망솔저,TM화TRAIL연합작용능유효제고SGC-7901세포적조망솔；TM능명현상조SGC-7901세포표면TRAIL-R2적표체수평,이대TRAIL-R1、-R3화-R4각무명현영향；TRAIL-R2 mRNA적표체수평수TM작용시간연장이상응승고；GRP78단백적상조화XBP-1 mRNA적전접활화증실료TM가유도미절첩단백반응(unfolded protein response,UPR)적발생；CHOP단백적표체수평야재TM작용후상조.결론:TM통과유도UPR상조TRAIL-R2적표체,종이증가위암세포대TRAIL적민감성,CHOP개도료TRAIL-R2적상조작용.