棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2013年
1期
45-50
,共6页
孙硕%张坤%谭桂玉%曹振%南铁贵%王保民
孫碩%張坤%譚桂玉%曹振%南鐵貴%王保民
손석%장곤%담계옥%조진%남철귀%왕보민
转Bt抗虫棉%双抗夹心酶免疫法%种子纯度%偶然基因改造成分混杂
轉Bt抗蟲棉%雙抗夾心酶免疫法%種子純度%偶然基因改造成分混雜
전Bt항충면%쌍항협심매면역법%충자순도%우연기인개조성분혼잡
应用中国农业大学化控中心筛选的抗Bt Cry1Ac蛋白鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了Bt Cry1Ac蛋白的双抗夹心酶联免疫检测法(Sandwich ELISA).该方法的检测范围为0.78～50.0 ng· g-1,线性回归方程y=0.6634x-1.7387,决定系数为0.992.该方法与国外商业化试剂盒检测结果完全一致,可用于转基因抗虫棉Bt毒蛋白定性和定量检测.采用所建立的方法对亲本之一为非转基因抗虫棉的杂交F1、F2种子进行检测,结果F1全部为阳性,F2阴性和阳性数量比为1∶3,符合性状分离定律；此外,模拟检测种子的偶然基因改造成分混杂(Adventitious Presence,AP)检测结果为:对于Bt毒蛋白含量在140 ng以上的单粒种子,最低检测比例为1∶110.
應用中國農業大學化控中心篩選的抗Bt Cry1Ac蛋白鼠單剋隆抗體和兔多剋隆抗體,建立瞭Bt Cry1Ac蛋白的雙抗夾心酶聯免疫檢測法(Sandwich ELISA).該方法的檢測範圍為0.78～50.0 ng· g-1,線性迴歸方程y=0.6634x-1.7387,決定繫數為0.992.該方法與國外商業化試劑盒檢測結果完全一緻,可用于轉基因抗蟲棉Bt毒蛋白定性和定量檢測.採用所建立的方法對親本之一為非轉基因抗蟲棉的雜交F1、F2種子進行檢測,結果F1全部為暘性,F2陰性和暘性數量比為1∶3,符閤性狀分離定律；此外,模擬檢測種子的偶然基因改造成分混雜(Adventitious Presence,AP)檢測結果為:對于Bt毒蛋白含量在140 ng以上的單粒種子,最低檢測比例為1∶110.
응용중국농업대학화공중심사선적항Bt Cry1Ac단백서단극륭항체화토다극륭항체,건립료Bt Cry1Ac단백적쌍항협심매련면역검측법(Sandwich ELISA).해방법적검측범위위0.78～50.0 ng· g-1,선성회귀방정y=0.6634x-1.7387,결정계수위0.992.해방법여국외상업화시제합검측결과완전일치,가용우전기인항충면Bt독단백정성화정량검측.채용소건립적방법대친본지일위비전기인항충면적잡교F1、F2충자진행검측,결과F1전부위양성,F2음성화양성수량비위1∶3,부합성상분리정률；차외,모의검측충자적우연기인개조성분혼잡(Adventitious Presence,AP)검측결과위:대우Bt독단백함량재140 ng이상적단립충자,최저검측비례위1∶110.
