生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2013年
1期
70-76
,共7页
刘佳言%钱乐%郑高伟%许建和
劉佳言%錢樂%鄭高偉%許建和
류가언%전악%정고위%허건화
底物指纹谱%枯草芽胞杆菌基因组%高通量检测%水解酶家族%脂肪酶
底物指紋譜%枯草芽胞桿菌基因組%高通量檢測%水解酶傢族%脂肪酶
저물지문보%고초아포간균기인조%고통량검측%수해매가족%지방매
基于GenBank公布的枯草芽胞杆菌168基因组序列,克隆表达了30个预测的酯水解酶基因.结果发现:其中7个酶对对硝基苯酚酯表现出明显的酯水解活力.它们在α/β水解酶家族中分属5个不同的亚家族.通过显色底物和pH指示剂进行的高通量筛选,分别绘制了这7个酶的底物指纹谱.考察了酶催化手性酯水解反应的对映选择性,结果表明:对硝基苄基酯酶PnbA和S-脱乙酰化酶Cah对手性醇的乙酸酯具有较广的底物谱,而PnbA和羧酸酯酶Nap分别对DL-薄荷醇乙酸酯和2-氯-1-苯乙醇乙酸酯/2-萘乙醇乙酸酯有极好的对映选择性(E ＞200).此外,发现酯酶YitV催化2-氯-1-苯乙醇乙酸酯水解的反应遵循反-Kazlauskas规则.
基于GenBank公佈的枯草芽胞桿菌168基因組序列,剋隆錶達瞭30箇預測的酯水解酶基因.結果髮現:其中7箇酶對對硝基苯酚酯錶現齣明顯的酯水解活力.它們在α/β水解酶傢族中分屬5箇不同的亞傢族.通過顯色底物和pH指示劑進行的高通量篩選,分彆繪製瞭這7箇酶的底物指紋譜.攷察瞭酶催化手性酯水解反應的對映選擇性,結果錶明:對硝基芐基酯酶PnbA和S-脫乙酰化酶Cah對手性醇的乙痠酯具有較廣的底物譜,而PnbA和羧痠酯酶Nap分彆對DL-薄荷醇乙痠酯和2-氯-1-苯乙醇乙痠酯/2-萘乙醇乙痠酯有極好的對映選擇性(E ＞200).此外,髮現酯酶YitV催化2-氯-1-苯乙醇乙痠酯水解的反應遵循反-Kazlauskas規則.
기우GenBank공포적고초아포간균168기인조서렬,극륭표체료30개예측적지수해매기인.결과발현:기중7개매대대초기분분지표현출명현적지수해활력.타문재α/β수해매가족중분속5개불동적아가족.통과현색저물화pH지시제진행적고통량사선,분별회제료저7개매적저물지문보.고찰료매최화수성지수해반응적대영선택성,결과표명:대초기변기지매PnbA화S-탈을선화매Cah대수성순적을산지구유교엄적저물보,이PnbA화최산지매Nap분별대DL-박하순을산지화2-록-1-분을순을산지/2-내을순을산지유겁호적대영선택성(E ＞200).차외,발현지매YitV최화2-록-1-분을순을산지수해적반응준순반-Kazlauskas규칙.
