生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2013年
1期
65-69
,共5页
秦迎春%刘鹏%杨立荣%徐刚%吴坚平
秦迎春%劉鵬%楊立榮%徐剛%吳堅平
진영춘%류붕%양립영%서강%오견평
2-氯丙酸%脱卤酶%定向进化%分子对接
2-氯丙痠%脫滷酶%定嚮進化%分子對接
2-록병산%탈서매%정향진화%분자대접
通过易错PCR手段将R-2-氯丙酸脱卤酶定向进化,并使用基于Cl-浓度显色反应的高通量筛选得到有效突变子库,发现突变子DehDIV-G2和DehDIV-E7的酶比活力分别提高25.2％和38.7％.通过SYBYL对酶与底物进行分子对接显示,DehDIV G2的活化能下降0.961 4 kJ/mol,DehDIV E7的活化能下降2.549 8 kJ/mol.由于酶和底物R-2-氯丙酸的活化能下降,亲和能力提高,从而提高酶的比活力.
通過易錯PCR手段將R-2-氯丙痠脫滷酶定嚮進化,併使用基于Cl-濃度顯色反應的高通量篩選得到有效突變子庫,髮現突變子DehDIV-G2和DehDIV-E7的酶比活力分彆提高25.2％和38.7％.通過SYBYL對酶與底物進行分子對接顯示,DehDIV G2的活化能下降0.961 4 kJ/mol,DehDIV E7的活化能下降2.549 8 kJ/mol.由于酶和底物R-2-氯丙痠的活化能下降,親和能力提高,從而提高酶的比活力.
통과역착PCR수단장R-2-록병산탈서매정향진화,병사용기우Cl-농도현색반응적고통량사선득도유효돌변자고,발현돌변자DehDIV-G2화DehDIV-E7적매비활력분별제고25.2％화38.7％.통과SYBYL대매여저물진행분자대접현시,DehDIV G2적활화능하강0.961 4 kJ/mol,DehDIV E7적활화능하강2.549 8 kJ/mol.유우매화저물R-2-록병산적활화능하강,친화능력제고,종이제고매적비활력.
