生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2013年
1期
47-53
,共7页
韩磊%陈曦%冯进辉%吴洽庆%朱敦明
韓磊%陳晞%馮進輝%吳洽慶%硃敦明
한뢰%진희%풍진휘%오흡경%주돈명
2-脱氧-d-核糖5-磷酸醛缩酶%基因挖掘%金黄色葡萄球菌
2-脫氧-d-覈糖5-燐痠醛縮酶%基因挖掘%金黃色葡萄毬菌
2-탈양-d-핵당5-린산철축매%기인알굴%금황색포도구균
利用基因挖掘在数据库中发现一种来自Staphylococcus aureus N315的潜在DERA(SaDERA),将其基因密码子优化后实现了在大肠杆菌中的表达,重组酶经纯化后研究了其催化性质.结果表明:构建的工程菌具有较高的可溶表达量(占总蛋白的70％),通过简单的一步纯化即可得到电泳纯的酶；SaDERA是一种同源二聚体的酶(5.7×104),其最适反应条件是pH7.7和45℃；SaDERA具有良好的碱耐受性,在pH 11.0、25℃的条件下温浴24h后仍有93％的残余活力；SaDERA具有良好的乙醛耐受性,在0.3 mol/L乙醛浓度、25℃下,30 min内保持了70％以上的残余活力；乙醛连续自缩合产物被纯化并鉴定,所得产品为两次缩合产物.
利用基因挖掘在數據庫中髮現一種來自Staphylococcus aureus N315的潛在DERA(SaDERA),將其基因密碼子優化後實現瞭在大腸桿菌中的錶達,重組酶經純化後研究瞭其催化性質.結果錶明:構建的工程菌具有較高的可溶錶達量(佔總蛋白的70％),通過簡單的一步純化即可得到電泳純的酶；SaDERA是一種同源二聚體的酶(5.7×104),其最適反應條件是pH7.7和45℃；SaDERA具有良好的堿耐受性,在pH 11.0、25℃的條件下溫浴24h後仍有93％的殘餘活力；SaDERA具有良好的乙醛耐受性,在0.3 mol/L乙醛濃度、25℃下,30 min內保持瞭70％以上的殘餘活力；乙醛連續自縮閤產物被純化併鑒定,所得產品為兩次縮閤產物.
이용기인알굴재수거고중발현일충래자Staphylococcus aureus N315적잠재DERA(SaDERA),장기기인밀마자우화후실현료재대장간균중적표체,중조매경순화후연구료기최화성질.결과표명:구건적공정균구유교고적가용표체량(점총단백적70％),통과간단적일보순화즉가득도전영순적매；SaDERA시일충동원이취체적매(5.7×104),기최괄반응조건시pH7.7화45℃；SaDERA구유량호적감내수성,재pH 11.0、25℃적조건하온욕24h후잉유93％적잔여활력；SaDERA구유량호적을철내수성,재0.3 mol/L을철농도、25℃하,30 min내보지료70％이상적잔여활력；을철련속자축합산물피순화병감정,소득산품위량차축합산물.
