江苏预防医学
江囌預防醫學
강소예방의학
JIANGSU JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE
2013年
1期
4-6
,共3页
张文帅%迟莹%张黎%温恬%曾晓燕%焦永军
張文帥%遲瑩%張黎%溫恬%曾曉燕%焦永軍
장문수%지형%장려%온념%증효연%초영군
发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒%Gn和Gc蛋白%分段表达
髮熱伴血小闆減少綜閤徵佈尼亞病毒%Gn和Gc蛋白%分段錶達
발열반혈소판감소종합정포니아병독%Gn화Gc단백%분단표체
目的 分段表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV) Gn和Gc蛋白.方法 采用PCR方法克隆了SFTSV Gn和Gc基因上三段相互重叠的基因片段Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3,将PCR产物分别连接到原核表达载体pET28a(+)上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),将其分别转化感受态菌BL21,IPTG诱导表达,通过Western blot鉴定Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3蛋白的表达.结果 成功构建重组质粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),Western blot可见Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2和Gc3编码蛋白的成功表达.结论 Gn和Gc蛋白的分段表达成功,为进一步深入研究SFTSV的Gn和Gc蛋白结构与功能及精确定位其抗原表位奠定了基础.
目的 分段錶達髮熱伴血小闆減少綜閤徵佈尼亞病毒(SFTSV) Gn和Gc蛋白.方法 採用PCR方法剋隆瞭SFTSV Gn和Gc基因上三段相互重疊的基因片段Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3,將PCR產物分彆連接到原覈錶達載體pET28a(+)上,經酶切、PCR、測序鑒定,穫得重組質粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),將其分彆轉化感受態菌BL21,IPTG誘導錶達,通過Western blot鑒定Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3蛋白的錶達.結果 成功構建重組質粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),Western blot可見Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2和Gc3編碼蛋白的成功錶達.結論 Gn和Gc蛋白的分段錶達成功,為進一步深入研究SFTSV的Gn和Gc蛋白結構與功能及精確定位其抗原錶位奠定瞭基礎.
목적 분단표체발열반혈소판감소종합정포니아병독(SFTSV) Gn화Gc단백.방법 채용PCR방법극륭료SFTSV Gn화Gc기인상삼단상호중첩적기인편단Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3,장PCR산물분별련접도원핵표체재체pET28a(+)상,경매절、PCR、측서감정,획득중조질립pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),장기분별전화감수태균BL21,IPTG유도표체,통과Western blot감정Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3단백적표체.결과 성공구건중조질립pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),Western blot가견Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2화Gc3편마단백적성공표체.결론 Gn화Gc단백적분단표체성공,위진일보심입연구SFTSV적Gn화Gc단백결구여공능급정학정위기항원표위전정료기출.
