淡水渔业
淡水漁業
담수어업
FRESHWATER FISHERIES
2013年
1期
74-77
,共4页
刘品%李超%黄吉芹%吉红
劉品%李超%黃吉芹%吉紅
류품%리초%황길근%길홍
RNA提取%脂肪细胞%草鱼(Ctenopharyngodon idellus)
RNA提取%脂肪細胞%草魚(Ctenopharyngodon idellus)
RNA제취%지방세포%초어(Ctenopharyngodon idellus)
获得高质量的RNA是逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及转录组测序(RNA-Seq)等分子生物学研究的基础,由于草鱼脂肪细胞中油脂含量较高,从中提取高质量RNA存在困难.本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪细胞为材料,通过增加离心和抽提次数等方式对传统总RNA提取方法进行优化,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸定量分析及基因扩增等方法验证所得RNA的完整性、纯度及质量.结果表明,经此方法提取的草鱼成熟脂肪细胞总RNA的A260nm/A280nm比值在1.95到2.00之间,28S和18S条带完整,草鱼LPL和β-actin基因扩增条带清晰.认为采用本方法获得的草鱼脂肪细胞RNA样品质量较高,能够用于后续分子生物学研究.
穫得高質量的RNA是逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)、Northern blot以及轉錄組測序(RNA-Seq)等分子生物學研究的基礎,由于草魚脂肪細胞中油脂含量較高,從中提取高質量RNA存在睏難.本研究以草魚(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪細胞為材料,通過增加離心和抽提次數等方式對傳統總RNA提取方法進行優化,採用瓊脂糖凝膠電泳、覈痠定量分析及基因擴增等方法驗證所得RNA的完整性、純度及質量.結果錶明,經此方法提取的草魚成熟脂肪細胞總RNA的A260nm/A280nm比值在1.95到2.00之間,28S和18S條帶完整,草魚LPL和β-actin基因擴增條帶清晰.認為採用本方法穫得的草魚脂肪細胞RNA樣品質量較高,能夠用于後續分子生物學研究.
획득고질량적RNA시역전록취합매련식반응(RT-PCR)、Northern blot이급전록조측서(RNA-Seq)등분자생물학연구적기출,유우초어지방세포중유지함량교고,종중제취고질량RNA존재곤난.본연구이초어(Ctenopharyngodon idellus)성숙지방세포위재료,통과증가리심화추제차수등방식대전통총RNA제취방법진행우화,채용경지당응효전영、핵산정량분석급기인확증등방법험증소득RNA적완정성、순도급질량.결과표명,경차방법제취적초어성숙지방세포총RNA적A260nm/A280nm비치재1.95도2.00지간,28S화18S조대완정,초어LPL화β-actin기인확증조대청석.인위채용본방법획득적초어지방세포RNA양품질량교고,능구용우후속분자생물학연구.
